[发明专利]一种以核酸适配体检测ATP的试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201710347343.9 | 申请日： | 2017-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN106932577B | 公开（公告）日： | 2019-03-15 |
| 发明（设计）人： | 赵强;李亚飘;孙琳琳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生态环境研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 任岩 |
| 地址： | 100085*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 体检 atp 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.一种以核酸适配体检测ATP的试剂盒，其包括序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核酸适配体以及四甲基罗丹明标记的ATP。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括ATP分子作为阳性对照。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括pH为6～10的缓冲液。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液的pH值为7.5，包括50mMTris-HCl和50mM MgCl2。
5.一种检测ATP的方法，其是将序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的核酸适配体、四甲基罗丹明标记的ATP与待测样本混合后温育，测定TMR的荧光各向异性变化值或荧光偏振变化值。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述核酸适配体的使用浓度为5μM。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述四甲基罗丹明标记的ATP的使用浓度为10nM。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述待测样本进行预处理，即将待测样本采用pH为6～10的缓冲液进行稀释。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述温育的温度为20～30℃。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述温育的温度为25℃。
11.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述温育是在pH为6～10的缓冲液中进行。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述缓冲液的pH值为7.5，包括50mMTris-HCl和50mM MgCl2。
13.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述测定TMR的荧光各向异性变化值或荧光偏振变化值是在10℃下测定；
所述测定TMR的荧光各向异性变化值或荧光偏振变化值的检测条件是：激发波长为555nm，发射波长为580nm。
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