[发明专利]骨化二醇发酵的补料培养基、发酵的补料方法及其发酵方法有效
| 申请号： | 201710334695.0 | 申请日： | 2017-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN107365805B | 公开（公告）日： | 2021-08-03 |
| 发明（设计）人： | 梁彦明;曾志刚;翟龙飞;许之晖 | 申请（专利权）人： | 太原市威尔潞威科技发展有限公司;成都大学 |
| 主分类号： | C12P7/02 | 分类号： | C12P7/02;C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 王学强;罗满 |
| 地址： | 030032 山西省太原*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 骨化 发酵 培养基 方法 及其 | ||
1.一种骨化二醇发酵的补料培养基，其特征在于，所述补料培养基包括：蛋白胨0.5 g/l00ml、硫酸铵0.2 g/l00ml、葡萄糖0.5 g/l00ml、磷酸二氢钠 0.2 g/l00ml、硫酸镁 0.2g/l00ml、微量元素0.0003 g/l00ml、缬氨酸1.0g/l00ml，所述微量元素为氯化锰和氯化铁。
2.一种骨化二醇发酵的补料方法，其特征在于，所述方法包括：
提供发酵液，向所述发酵液中加入补料培养基和水，发酵，得到料液，所述料液中包括所述骨化二醇；以重量份计，所述补料培养基包括：蛋白胨0.5 g/l00ml、硫酸铵0.2 g/l00ml、葡萄糖0.5 g/l00ml、磷酸二氢钠 0.2 g/l00ml、硫酸镁 0.2 g/l00ml、微量元素0.0003 g/l00ml、缬氨酸1.0g/l00ml，所述微量元素为氯化锰和氯化铁；
向所述发酵液中加入补料培养基具体为：向所述发酵液中加入补料培养基，直至料液中菌丝体浓度为25%（v/v）时，停止加入所述补料培养基；以发酵液的体积计，向所述发酵液中加入补料培养基的速率为2%/24h；
向所述发酵液中加入水具体为：当发酵液中的溶氧低于30%（m/v）时，向所述发酵液中加入水；
以发酵液的体积计，向所述发酵液中加入水的速率为3% / h。
3.一种骨化二醇的发酵方法，其特征在于，所述方法包括：
1）提供种子液和发酵培养基；
2）种子液接入所述发酵培养基，发酵，得到发酵液；
3）向步骤2）得到的发酵液中加入补料培养基和水，发酵，得到料液，所述料液中包括所述骨化二醇；所述补料培养基包括：蛋白胨0.5 g/l00ml、硫酸铵0.2 g/l00ml、葡萄糖0.5g/l00ml、磷酸二氢钠 0.2 g/l00ml、硫酸镁 0.2 g/l00ml、微量元素0.0003 g/l00ml、缬氨酸1.0g/l00ml，所述微量元素为氯化锰和氯化铁；
4）所述步骤3）得到的料液经萃取，浓缩，柱层析和结晶，得到所述骨化二醇。
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