[发明专利]使用新的杂交缓冲液用于检测染色体畸变的组合物和方法

权利要求书

1.一种荧光原位杂交组合物，所述组合物包含：杂交溶液、至少一种检测染色体畸变相关核苷酸序列的分子探针、和足以变性双链核苷酸序列的有效量的至少一种极性非质子溶剂，其中所述极性非质子溶剂不是二甲亚砜（DMSO），其中所述极性非质子溶剂是，且其中所述组合物还包含选自以下的至少一种额外组分：缓冲剂、盐、促进剂、螯合剂、去垢剂和封闭剂，其中所述极性非质子溶剂浓度为10%（v/v）至50%（v/v）。

2.根据权利要求1所述的杂交组合物，其中所述极性非质子溶剂浓度为10%（v/v）至20%（v/v）或20%（v/v）至30%（v/v）。

3.根据权利要求1所述的杂交组合物，其中所述极性非质子溶剂是无毒的。

4.根据权利要求1-3任一项所述的杂交组合物，其中所述组合物不含甲酰胺。

5.根据权利要求3所述的杂交组合物，其中所述组合物含有小于10%甲酰胺。

6.根据权利要求5所述的杂交组合物，其中所述组合物含有小于2%甲酰胺。

7.根据权利要求6所述的杂交组合物，其中所述组合物含有小于1%甲酰胺。

8.根据权利要求1所述的杂交组合物，其中所述促进剂是硫酸葡聚糖，所述盐是NaCl，且所述缓冲剂是磷酸缓冲液。

9. 根据权利要求8所述的杂交组合物，其中硫酸葡聚糖浓度是5%至40%，NaCl浓度是0mM至1200 mM，且所述磷酸缓冲液浓度是0 mM至50 mM。

10. 根据权利要求9所述的杂交组合物，其中硫酸葡聚糖浓度是10%至30%，NaCl浓度是300 mM至600 mM，且所述磷酸缓冲液浓度是5 mM至20 mM。

11.根据权利要求1所述的杂交组合物，其中所述促进剂选自：甲酰胺、甘油、二醇，所述缓冲剂是柠檬酸缓冲剂。

12.根据权利要求11所述的杂交组合物，其中所述甲酰胺浓度是0.1-5%，甘油的浓度均是0.1%至10%，二醇的浓度是0.1%至10%，所述柠檬酸缓冲剂浓度是1 mM至50 mM。

13.根据权利要求1所述的杂交组合物，其中所述封闭剂选自：人类总DNA、鲱鱼精子DNA、鲑鱼精子DNA和小牛胸腺DNA。

14. 根据权利要求13所述的杂交组合物，其中所述人类总DNA、鲱鱼精子DNA、鲑鱼精子DNA和小牛胸腺DNA的浓度是0.01-10 μg/μl。

15. 根据权利要求1或3所述的杂交组合物，所述组合物包含40%（v/v）的至少一种极性非质子溶剂、10%硫酸葡聚糖、300 mM NaCl和5 mM磷酸缓冲液。

16. 根据权利要求1-3任一项所述的杂交组合物，所述组合物包含15%（v/v）的至少一种极性非质子溶剂、20%硫酸葡聚糖、600 mM NaCl、10 mM磷酸缓冲液和0.1 μg/μl人类总DNA。

17. 根据权利要求1-3任一项所述的杂交组合物，所述组合物包含15%（v/v）的至少一种极性非质子溶剂、20%硫酸葡聚糖、600 mM NaCl、10 mM柠檬酸缓冲剂pH 6.2以及0.1 μg/μl鲱鱼精子DNA、或0.1 μg/μl鲑鱼精子DNA、或0.1 μg/μl小牛胸腺DNA、或0.5%甲酰胺、或1%乙二醇、或1%1,3-丙二醇。

18.根据权利要求1-3任一项所述的杂交组合物，所述组合物在室温下包含不止一相。

19.根据权利要求1-3任一项所述的杂交组合物，所述组合物在室温下包含两相或者三相。