[发明专利]四色TORCH荧光检测试剂盒在审
申请号: | 201710315689.0 | 申请日: | 2017-05-08 |
公开(公告)号: | CN107058631A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 刘淑园;陈华云;肖湘文;丁渭 | 申请(专利权)人: | 广州和实生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/93;C12R1/90 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 510535 广东省广州市高新技术*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | torch 荧光 检测 试剂盒 | ||
1.四色TORCH荧光检测试剂盒,包括DNA提取液、热启动Taq酶系统、引物、荧光探针、阴性对照和阳性对照,其特征在于:所述荧光探针为TORCH特异性MGB探针,TORCH特异性MGB探针的序列如下:
探针1 CATCGCGTCTGTAGTCCCCTTCGA(SEQ ID NO:1)
探针2 CGAATTGCCACGGCCCCGA(SEQ ID NO:2)
探针3 AGCCATCCACATCTCCCGCTTATCCTC(SEQ ID NO:3)
探针4 TGGGGTTGGGTGGTGGAGGAGA(SEQ ID NO:4)
探针5 CGACACCCTCCATACTGCCGAAG(SEQ ID NO:5)
上述探针的3’端连接有MGB,5’端连接有荧光基团。
2.根据权利要求1所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述探针1用于检测弓形虫;探针2用于检测风疹病毒;探针3用于检测巨细胞病毒;探针4~5用于检测单纯疱疹 I 型和 II 型病毒。
3.根据权利要求1所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述引物序列为:
引物1 TCATCTACAGTCCTGATATCTCTCCT(SEQ ID NO:6)
引物2 GGAGCCACAGAAGGGACAG(SEQ ID NO:7)
引物3 ACACCGGCAATCAGCAGTCC(SEQ ID NO:8)
引物4 GCGAGCAGTCAGGGGAATG(SEQ ID NO:9)
引物5 CTATGCAGAGCATGTATGAGAAC(SEQ ID NO:10 )
引物6 CACATCATGCAGCTCCTT(SEQ ID NO:11)
引物7 TTATCCCATTCCTTTTGGTTCTT(SEQ ID NO:12)
引物8 GGGTCATGTTGGGGGCTT(SEQ ID NO:13)
引物9 GTCAGCCCATCCTCCTTCG(SEQ ID NO:14)
引物10 GGGAAGCATTTACGAGAGCG(SEQ ID NO:15)。
4.根据权利要求1所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述热启动Taq酶系统中添加有UDG酶。
5.根据权利要求1或4所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述热启动Taq酶系统含有经过化学修饰的热启动Taq酶、dNTPs和UDG酶,其中每人份体系中热启动Taq酶为4~7U,dNTPs为0.1~0.4mmol/L,UDG酶为0.1~0.5U。
6.根据权利要求1所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述DNA提取液的组成为EDTA的浓度为0.15~0.75mol/L、乙酸钠的浓度为15~35mmol/L和DTT的浓度为1~5mmol/L。
7.根据权利要求1或2所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述探针1连接的荧光基团不同于探针2~5连接的荧光基团。
8.根据权利要求1或2所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述探针2连接的荧光基团不同于探针1,3~5连接的荧光基团。
9.根据权利要求1或2所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述探针3连接的荧光基团不同于探针1,2,4,5连接的荧光基团。
10.根据权利要求1或2所述的四色TORCH荧光检测试剂盒,其特征在于:所述探针4~5连接的荧光基团不同于探针1~3连接的荧光基团。
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