[发明专利]基于细长反应腔的全基因组扩增方法

权利要求书

1.一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，将多重链置换扩增反应体系注入细长型的反应腔中，完成对目标基因组的全基因组扩增；所述的细长型的反应腔，反应腔中反应溶液所处的区域，区域总长度和反应腔内部平均横截面积的平方根之间的比值在5：1到2×10⁶：1之间。

2.根据权利要求1所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的多重链置换扩增，是采用具有链置换能力的核酸聚合酶和随机序列引物，在恒温的条件下，对目标基因组核酸片段进行扩增，提高其绝对质量。

3.根据权利要求2所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的具有链置换能力的核酸聚合酶，包括Φ29DNA聚合酶，Klenow DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶。

4.根据权利要求2所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的随机序列引物，其长度为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40个碱基，其中包含一个或多个简并碱基。

5.根据权利要求2所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的随机序列引物，为普通未修饰引物，或者为经过硫代修饰、硫酸化修饰或氨基修饰的修饰引物。

6.根据权利要求1所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的细长型的反应腔，反应腔中反应溶液所处的区域，反应腔内部的平均横截面积在25平方微米到4平方毫米之间。

7.根据权利要求1所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的细长型的反应腔，反应腔的横截面为圆形、椭圆形、正方形或长方形，反应腔各部分的横截面相同或者不相同。

8.根据权利要求1所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的细长型的反应腔，反应腔是塑料、玻璃或金属材质的微细管道，或者是通过微加工工艺在微流控芯片中制备的细长形流道。

9.根据权利要求1所述的一种基于细长反应腔的全基因组扩增方法，其特征在于，所述的目标基因组，为一种或多种人类、动物、植物或微生物的基因组，目标基因组的规模，为单细胞基因组或多细胞基因组。