[发明专利]一种核酸提取方法及其提取试剂

权利要求书

1.一种核酸提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：样本与提取试剂按比例混匀，于85-95℃裂解3-5min，裂解期间弹匀1-2次；待颗粒沉降后，上清即为释放的核酸；其中所述提取试剂包括：Tris，EDTA，3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸、NP－40，Tween-20,Chelex-100，水；其中Tris的浓度为5-10mM；EDTA的浓度为5-10mM；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸的体积百分含量浓度为0.005％-0.02％；NP－40的百分含量浓度为0.01％－0.2％；Tween-20体积百分含量浓度为0.01-0.2％；Chelex-100的体积含量为1－20％；所述提取试剂PH为6－9。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，其中，样本与提取试剂的体积比为50:10-50。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，对于鼻咽拭子、肛拭子、痰液、唾液、血清、血浆、全血、尿液类样本，直接取样与提取试剂按比例混匀，于90℃裂解4min，裂解期间弹匀1次。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，对于干血斑、精斑样本，先用1×TE溶解后混匀，与提取试剂按比例混匀，90℃裂解4min，裂解期间弹匀1次。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，对于粪便样本：对水样便采取200μl，成形便采取黄豆大小的粪量，加入500μl生理盐水，5000rpm离心2min，转移30－50μl上清至另一干净、无核酸酶的EP管中。13000rpm离心1-2min，弃上清，沉淀中加入50μl核酸提取液，漩涡震荡20S，90℃裂解4min，裂解期间弹匀1次。

6.一种提取试剂，其特征在于，包括以下组分：Tris，EDTA，3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸、NP－40，Tween-20,Chelex-100，水。

7.根据权利要求6所述的提取试剂，其中Tris的浓度为5-10mM；EDTA的浓度为5-10mM；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸的体积百分含量浓度为0.005％-0.02％；NP－40的百分含量浓度为0.01％－0.2％；Tween-20体积百分含量浓度为0.01-0.2％；Chelex-100的体积含量为1－20％；所述提取试剂PH为6－9。

8.一种试剂盒，其特征在于，包括以下试剂：Tris，EDTA，3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸、NP－40，Tween-20,Chelex-100，水。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，其中Tris的浓度为5-10mM；EDTA的浓度为5-10mM；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸的体积百分含量浓度为0.005％-0.02％；NP－40的百分含量浓度为0.01％－0.2％；Tween-20体积百分含量浓度为0.01-0.2％；Chelex-100的体积含量为1－20％；所述提取试剂PH为6－9。