[发明专利]一种快速筛选、鉴定及定量发酵食品中耐酸乳杆菌的方法有效
申请号: | 201710285328.6 | 申请日: | 2017-04-27 |
公开(公告)号: | CN106906302B | 公开(公告)日: | 2019-09-03 |
发明(设计)人: | 徐岩;吴群;王石垒 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/225 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 筛选 鉴定 定量 发酵 食品 耐酸 杆菌 方法 | ||
1.一种耐酸乳杆菌的筛选、鉴定或定量方法,其特征在于,所述方法是以核苷酸序列为SEQ ID NO.1的糖基水解酶基因作为模板设计引物对进行PCR;所述引物对的核苷酸序列为LaF1:5′-AACATCCCCAGAGCGTCAAG-3′;LaR1:5′-GGCACTACCCCAAGCATCTT-3′。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述引物对进行PCR得到的产物的条带在100~250bp之间。
3.一种用于耐酸乳杆菌筛选、鉴定或定量的引物对,其特征在于,所述引物对的核苷酸序列为LaF1:5′-AACATCCCCAGAGCGTCAAG-3′;LaR1:5′-GGCACTACCCCAAGCATCTT-3′。
4.权利要求3所述引物对在耐酸乳杆菌筛选鉴定方面的应用,其特征在于,所述应用是利用权利要求3所述的引物对进行菌落PCR。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述筛选是在每升MRS培养基主溶液的基础上,添加1~5mL副溶液混匀使用;副溶液的组成:指示剂溴甲酚绿0.01~0.02g/mL,营养因子,制霉素0.04~0.06g/mL,溶剂为二甲基亚砜,其中,所述营养因子为D-天冬氨酸二甲酯盐酸盐0.01~0.02g/mL、甲瓦龙酸内脂0.005~0.015g/mL和维生素B11 0.01~0.015g/mL。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述应用的应用领域为发酵食品领域。
7.权利要求3所述引物对在耐酸乳杆菌定量方面的应用,其特征在于,所述应用是利用权利要求3所述引物对进行荧光定量聚合酶链式反应。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用的应用领域为发酵食品领域。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用中循环阈值x与耐酸乳杆菌菌液浓度对数y的标准曲线为y=-0.2237x+8.9658,R2=0.999。
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