[发明专利]一种谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：

(1)以双硫键交联的聚乙烯亚胺的制备：

将聚乙烯亚胺溶于甲醇水溶液中，得到聚乙烯亚胺溶液；在氮气及避光的环境下将N,N'-双(丙烯酰)胱胺的甲醇溶液缓慢滴加入聚乙烯亚胺溶液中，并加热搅拌；一段时间后，加入去离子水稀释，并恢复至室温，终止反应；调节pH值，透析，冷冻干燥，得到双硫键交联的聚乙烯亚胺；

(2)丙烯酸酯封端的聚己内酯的制备：

将末端为双羟基基团的聚己内酯溶于干燥的甲苯中，聚己内酯的甲苯溶液先抽真空并通氮气后，再依次将三乙胺和丙烯酰氯在冰浴和避光的条件下缓慢滴加入其中；滴加结束后，升高温度，开始反应；反应结束后，将反应液过滤除去三乙胺盐酸盐结晶，滤液在过量的冷正己烷中沉淀，抽滤，收集白色粉末，最后干燥得到丙烯酸酯封端的聚己内酯；

(3)聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇的制备：

在一定的温度和氮气环境下，将双硫键交联的聚乙烯亚胺完全溶解于甲醇中，然后将步骤(2)制备的丙烯酸酯封端的聚己内酯的氯仿溶液滴加入上述溶液，通氮气冷凝回流反应；反应结束后用过量的冷石油醚沉淀，得到白色沉淀再用二氯甲烷溶解后缓慢的滴加到去离子水中搅拌过夜，挥发有机溶剂后，冷冻干燥，得到聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺；再将聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺溶于磷酸盐缓冲液，调节pH，再加入末端基团为马来酰亚胺基和N-羟基丁二酰亚胺基的双官能团聚乙二醇，室温下反应，透析，冷冻干燥，制得聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇；

(4)谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的制备：

将步骤(3)制得的聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇用磷酸盐缓冲液复溶，得到聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇溶液，将多肽加入到已调好pH的聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇溶液中，在常温下反应，透析去除未反应的多肽，冷冻干燥，制得肿瘤靶向纳米载体，即谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束；

(5)将步骤(4)得到的谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束再用磷酸盐缓冲液复溶，得到谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束溶液；将疏水药物溶于丙酮中，然后将疏水药物的丙酮溶液缓慢滴加到谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束溶液中，搅拌，透析，冷冻干燥，制成疏水药物复合物；再与基因药物在磷酸盐缓冲液中复合，室温条件下涡旋，孵育，即得载有疏水药物和基因药物的谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束；

所述的基因药物与谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的质量比为1:5～30；

所述的疏水药物与谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的质量比为1:10～100；

所述的疏水药物为阿霉素、姜黄素或紫杉醇。

2.根据权利要求1所述的谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的聚乙烯亚胺、N,N'-双(丙烯酰)胱胺的摩尔比为4.0～8.0:1；

步骤(1)中所述的聚乙烯亚胺在反应体系中的浓度为0.02～0.06mol/L；

步骤(1)中所述的终止反应用的去离子水的体积为反应体系中溶液总体积的0.8～1.5倍。

3.根据权利要求1所述的谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的制备方法，其特征在于：

步骤(2)中所述的末端为双羟基基团的聚己内酯与丙烯酰氯、三乙胺的摩尔比为1：4～12：4～12；

所述的末端为双羟基基团的聚己内酯在反应体系中的浓度为0.001～0.005mol/L。

4.根据权利要求1所述的谷胱甘肽响应型靶向聚合物胶束的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的双硫键交联的聚乙烯亚胺与丙烯酸酯封端的聚己内酯、双官能团聚乙二醇的摩尔比为0.5～5.0：1：1.0～10.0；

步骤(3)中所述的丙烯酸酯封端的聚己内酯在聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺反应体系中的浓度为0.001～0.005mol/L；

步骤(3)中所述的聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺反应体系中，氯仿和甲醇的体积比为1～5：1；

步骤(3)中所述的聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺在聚己内酯-双硫键交联聚乙烯亚胺-聚乙二醇反应体系中的浓度为0.001～0.005mol/L。