[发明专利]一种蛋黄粉、其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种蛋黄粉、其制备方法及应用。

背景技术

自2009年以来，早期死亡综合症(EMS)，又称急性肝胰腺坏死综合症(AHPNS)给亚洲，特别是东南亚和中国的对虾养殖产业造成了前所未有的冲击。除了大规模减产外，该疾病还带来了诸多负面问题，例如：对虾养殖就业问题、社会福利问题、对虾供求问题和全球对虾总体价格问题等等。

2013年5月，美国亚利桑那大学水产病理实验室(UAZ-APL)定义急性肝胰腺坏死综合症(AHPNS)病原为副溶血弧菌的特异菌株，该菌株能够产生毒素并诱导健康对虾致病。2014年，在世界范围内普遍证实目前APHND的病因与副溶血弧菌所携带的毒素质粒所表达的PirA和PirB两种毒素相关。

蛋黄中除含有丰富的卵磷脂、卵黄高磷蛋白等营养因子，可促进幼体生长发育外，还含有其他一些抗病原微生物的功能因子，如卵粘蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂可抑制由病毒引起的血细胞凝聚且通过对巯基蛋白的抑制发挥抗菌，抗病毒的作用；诞酸及诞酸低聚糖、免疫球蛋白可促进幼体发育以及抗感染，特别是针对病毒引起的下痢具有抑制作用。高免鸡蛋在普通鸡蛋所含有的有效成分的基础上，还含有经特异抗原免疫后产生的高浓度的蛋黄抗体，这种含特异性抗体鸡蛋能在鸡蛋普遍提升机体营养供给和免疫水平的基础上，有效防御和抵抗病原的侵袭，是一种优质的新型饲料添加剂。

CN 101044884 B公开了一种卵黄抗体饲料添加剂制备方法。该方法利用经免疫的全蛋液在搅拌的同时向其中加入饲用麸皮，将混合均匀的免疫蛋麸皮料在恒温箱中干燥36h，而后在粉碎机作用下得到的饲料添加剂制备方法。CN 1507790 A公开了一种含有大肠杆菌卵黄抗体的饲用蛋白粉的制备方法及其应用。该蛋白粉内含有效价≥1:64的抗大肠杆菌的卵黄抗体。该制备方法是将免疫后的全蛋液进行巴氏杀菌、在常规喷雾干燥器中进行喷雾干燥得到饲用蛋白粉。上述方法的干燥时间过于漫长，不利于蛋黄免疫球蛋白活性的保持，鸡蛋中的主要作用成分是蛋黄中的蛋黄抗体，而蛋清却可以分离出来作为一种高附加值的食品成分经喷雾干燥后单独出售，其市场售价一般在普通蛋黄喷雾干燥产品的市场售价两倍左右。因此，在获取蛋黄抗体的同时，将蛋黄和蛋清分开制作成产品更有利于实际生产中的产业化。

随着抗生素作为饲料添加剂在世界范围内的相继禁止，蛋黄颗粒/粉作为新型饲料添加剂替代品在国内外已经相继有基础研究的报道，但其产业化目前还不尽成熟，鸡蛋黄颗粒/粉作为饲料添加剂的产业化已成为现代农业发展的迫切需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蛋黄粉、其制备方法及应用，该蛋白粉制备方法简单，免疫活性高。

为达到此发明的目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种蛋黄粉，所述蛋黄粉的原料按重量份数主要由以下原料制备得到：

蛋黄液20-30

微晶纤维素65-90；

其中所述蛋黄粉为颗粒或粉末状。

本发明中蛋黄液为20-30，例如可以是20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。

本发明中微晶纤维素为65-90，例如可以是65、66、68、70、72、74、75、76、78、80、82、85、86、88或90。

优选地，所述蛋黄粉的原料中的蛋黄液：微晶纤维素按质量比例为1:2-4。

优选地，所述蛋黄液为经抗原免疫后得到的含特异性抗体的蛋黄液。

优选地，所述蛋黄液中的卵黄抗体的效价≥1:12400。

优选地，所述抗原为pirA和pirB。

本发明中，所述的pirA和pirB作为一种毒素蛋白，通过基因工程手段从副溶血弧菌中获得，作为一种特异性可产生特异性抗体的蛋白，其作为抗原能够针对抗急性肝胰腺坏死综合症，相比于直接用副溶血弧菌作为抗原，以pirA和pirB蛋白作为抗原，专一性更强，抗性更强，效率更高。

优选地，所述pirA蛋白的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.1所示片段，所述序列如下：

优选地，所述pirB蛋白的氨基酸序列包含如SEQ ID NO.2所示片段，所述序列如下：

本发明中，所述pirA和pirB蛋白的氨基酸序列是特异性的产生特异性的抗体针对急性肝胰腺坏死综合症，灵敏度高，效果显著。

第二方面，本发明提供一种制备如第一方面所述的蛋黄粉的制备方法，所述方法包括如下步骤：