[发明专利]一种AR-V7表达检测试剂盒

权利要求书

1.一种AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，包括针对检测AR-V7 mRNA的捕获探针以及信号放大系统；所述信号放大系统包括有扩增探针和末端修饰有荧光基团的标记探针；其中，

所述捕获探针为茎环状，用于连接目标mRNA与扩增探针，每条捕获探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：茎部结构序列、能与待检测目标mRNA结合的特异性序列P1、间隔臂序列、P2序列，所述茎部结构序列可与P2序列3’端的碱基互补形成茎环结构，所述P2序列为不存在发夹结构，探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配，与P1、P4和AR-V7mRNA之间均不存在特异性结合的序列；

所述扩增探针连接捕获探针与标记探针，每条扩增探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：能与茎环状捕获探针的P2序列互补配对的P3序列、间隔臂序列、P4序列；所述P4序列为不存在发夹结构，探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配、与P1、P2、P3和AR-V7mRNA之间均不存在特异性结合的序列；

所述标记探针连接扩增探针与荧光基团，每条标记探针具有与相应扩增探针P4序列互补配对的P5序列，且末端修饰有荧光基团；

针对AR-V7mRNA的捕获探针中：特异性序列P1选自SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.10中的5条或5条以上；针对AR-V7 mRNA的捕获探针的茎部结构序列为SEQ ID NO.21；针对AR-V7mRNA的捕获探针的序列P2为SEQ ID NO.22；针对AR-V7 mRNA的扩增探针中，P3序列为SEQID NO.23，P4序列为SEQ ID NO.24。

2.根据权利要求1所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括有针对内参基因的mRNA的捕获探针以及信号放大系统，针对内参基因的mRNA的捕获探针以及信号放大系统与针对AR-V7mRNA的捕获探针以及信号放大系统的结构相同，但标记探针的末端修饰的荧光基团互不相同。

3.根据权利要求2所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述内参基因为ACTB。

4.根据权利要求3所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述ACTB mRNA的捕获探针中：特异性序列P1选自SEQ ID NO.11～SEQ ID NO.20中的5条或5条以上；针对ACTB基因mRNA的捕获探针的茎部结构序列为SEQ ID NO.25；针对ACTB基因mRNA的捕获探针的序列P2为SEQ ID NO.26；针对ACTB基因mRNA的扩增探针中，P3序列为SEQ ID NO.27，P4序列为SEQID NO.28。

5.根据权利要求1-4任一项所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述间隔臂序列的长度为5－10个碱基。

6.根据权利要求5所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述间隔臂序列为5－10个T。

7.根据权利要求5所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述间隔臂序列为5个T。

8.根据权利要求1-4任一项所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，所述荧光基团选自：FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705、AlexaFluor 488和Alexa Fluor 750。

9.根据权利要求 4所述的AR-V7表达检测试剂盒，其特征在于，针对AR-V7mRNA的捕获探针中：特异性序列P1为包括有SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.10；

针对ACTB mRNA的捕获探针中：特异性序列P1为包括有SEQ ID NO.11～SEQ ID NO.20。