[发明专利]一种棕榈酰化七肽、及其纯化方法和应用

说明书

本发明提供了一种棕榈酰化七肽及其纯化方法和应用，通过棕榈酰化修饰七肽获得增强多肽抗肿瘤活性的多肽。获得的棕榈酰化七肽的氨基酸序列如下所示：Palm‑Glu‑Tyr‑Phe‑Asp‑Ala‑Leu‑Ala，缩写为Palm‑EYFDALA，分子量1066.34Da。本发明获得的棕榈酰化七肽具有增强的抗肿瘤活性，同时还具有抗衰老活性，可应用于生物制药、食品、化妆品等领域。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种棕榈酰化七肽、及其在抗肿瘤制剂、化妆品或食品中的应用。

背景技术

根据世界卫生组织(WHO)统计，全世界有3/5的人死于癌症、糖尿病、心血管疾病、慢性呼吸系统疾病这4大类疾病，而癌症则是最主要的死因之一。2008年全球死于癌症的患者达760万人，占全球死亡人数的13％，其中超过70％的癌症死亡案例发生在中低收入国家，预测至2030年，全球将有超过110万人死于癌症。目前，对于癌症的治疗，药物治疗仍然是重要手段之一。因此，研究开发具有抗肿瘤活性的物质或制剂也一直是本领域技术人员的研究热点之一。

小分子肽是一类具有高活性的肽类物质，小分子肽可以以完整的形式被机体吸收；主动吸收、低耗或不需消耗能量的特点；能够直接进入血液循环并送到人体各个部位，广泛应用于生物医药领域。由于具有亲水性，蛋白质通常难以跨生物膜转运，因此，提高其膜渗透性改善其细胞内化率是重要的科学问题。通过对小分子肽进行修饰使其性能得以改善，也是本领域技术人员的研究方向之一。而开发具备抗肿瘤活性的小分子肽更是备受关注。

棕榈酰化是蛋白质翻译后脂质修饰的重要形式之一，在细胞信号传导、代谢、凋亡、疾病的发生、发展等过程中都起着重要的作用。根据连接方式不同，棕榈酰化可分为N型(棕榈酸盐通过酰胺键连接到Gly/Cys残基上)和S型(棕榈酸盐通过硫酯键共价修饰到Cys的巯基上)。

发明内容

本发明提供一种经棕榈酰化的七肽(Palm-EYFDALA)，本发明的棕榈酰化七肽相比于未经棕榈酰化的七肽具有明显增强的抗肿瘤活性，而且具有很好的抗氧化活性，可应用于生物制药和化妆品领域。

本发明提供的棕榈酰化七肽，缩写为Palm-EYFDALA，分子量1066.34Da，序列为Palm-Glu-Tyr-Phe-Asp-Ala-Leu-Ala，其化学结构式如下：

其中，前文序列中的Palm表示英文名称为Palmitoyl，中文名称为棕榈酰基；Glu表示英文名称为Glutamic acid，中文名称为谷氨酸的氨基酸的相应残基；Tyr表示英文名称为Tyrosine，中文名称为酪氨酸的氨基酸的相应残基；Phe表示英文名称为phenylalanine，中文名称为苯丙氨酸的氨基酸的相应残基；Asp表示英文名称为Aspartic acid，中文名称为天冬氨酸的氨基酸的相应残基；Ala表示英文名称为Alanine，中文名称为丙氨酸的氨基酸的相应残基；Leu表示英文名称为Leucine，中文名称为亮氨酸的氨基酸的相应残基。

本发明还提供上文所述的棕榈酰化七肽的纯化方法，可通过该方法来纯化通过多肽固相合成的棕榈酰化七肽，从而获得纯度大于95％的多肽。该方法包括如下步骤：

将待纯化的棕榈酰化七肽上样至色谱柱；

以流动相A和流动相B为洗脱液进行梯度洗脱，其中流动相A为含有0.08～0.12％三氟乙酸的乙腈溶液，流动相B为含有0.08～0.12％三氟乙酸的水；梯度洗脱程序为：流动相A的初始体积比例为22～28％，在上样后的第0.01min到第25min内，流动相A的体积比例上升到62～67％，在第25min到第25.1min内，流动相A的体积比例上升为100％，保持100％运行至第30min停止，检测波长为220nm；收集目标峰的多肽溶液。

进一步的，所述色谱柱为C₁₈色谱柱。