[发明专利]一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种甘薯组织培养技术领域，尤其涉及一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基及其制备方法。

背景技术

甘薯茎尖脱毒组织培养是指由甘薯的无毒或脱毒的茎尖诱导产生愈伤组织并再生出植株的过程，此过程主要是在固体培养基上进行，但是传统的固体培养基的pH值调节不便，在使用传统的固体培养基时，出苗率低，由于茎尖形成愈伤组织的能力差，幼苗生长慢，因而使得培养周期大大延长，增加了生产成本。

发明内容

本发明旨在解决现有技术的不足，而提供一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基及其制备方法。

本发明为实现上述目的，采用以下技术方案：一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基，其特征在于，由如下重量份数的原料组成：

作为优选，所述母液Ⅰ由如下重量份数的原料组成：

作为优选，所述母液Ⅱ由如下重量份数的原料组成：

作为优选，所述pH值采用氢氧化钠和盐酸进行调节。

本发明提供一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)根据配方分别称取母液Ⅰ和母液Ⅱ，并将其混合配制成基础培养基；

(2)向步骤(1)中的基础培养基按配方依次加入甘氨酸、盐酸硫胺素、肌糖、蔗糖、溴甲酚紫和吲哚-3-乙酸配制成完全培养基；

(3)向步骤(2)中的完全培养基加入琼脂，并调整培养基的pH值为5.8；

(4)室温下对培养基进行搅拌混合，然后进行分装并进行高压蒸汽灭菌，其中灭菌条件压强为103.0kPa，温度为130℃，反应时间为10-15min，高压蒸汽灭菌后制备得到所需的甘薯茎尖脱毒用固体培养基。

本发明的有益效果是：本发明通过添加溴甲酚紫，便于对固体培养基pH值进行调节，通过添加蔗糖，大大提高了茎尖出苗率，通过加入吲哚-3-乙酸，提高了茎尖形成愈伤组织的能力，幼苗生长快，因而使得培养周期大大缩短，节约了生产成本。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明：

实施例1

一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基，由如下重量份数的原料组成：

制备方法：以制备甘薯茎尖脱毒用固体培养基为例对本实施例提供的一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基的制备方法阐述如下：

(1)根据配方分别称取10份硝酸钾、25份硝酸铵、5份硫酸镁、3份氯化钙、0.01份碘化钾、0.02份硫酸铜、0.4份乙二胺四乙酸二钠、0.02份氯化钴、0.2份硫酸亚铁，并将其混合配制成基础培养基；

(2)向步骤(1)中的基础培养基按配方依次加入3份甘氨酸、0.3份盐酸硫胺素、50份肌糖、80份蔗糖、1份溴甲酚紫和0.2份吲哚-3-乙酸配制成完全培养基；

(3)向步骤(2)中的完全培养基加入100份琼脂，并调整培养基的pH值为5.8；

(4)室温下对培养基进行搅拌混合后，然后进行分装并进行高压蒸汽灭菌，其中灭菌条件压强为103.0kPa，温度为130℃，反应时间为10min，高压蒸汽灭菌后制备得到所需的甘薯茎尖脱毒用固体培养基。

实施例2

一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基，由如下重量份数的原料组成：

制备方法：以制备甘薯茎尖脱毒用固体培养基为例对本实施例提供的一种甘薯茎尖脱毒用固体培养基的制备方法阐述如下：

(1)根据配方分别称取15份硝酸钾、30份硝酸铵、8份硫酸镁、5份氯化钙、0.03份碘化钾、0.04份硫酸铜、0.7份乙二胺四乙酸二钠、0.02份氯化钴、0.4份硫酸亚铁，并将其混合配制成基础培养基；

(2)向步骤(1)中的基础培养基按配方依次加入6份甘氨酸、0.5份盐酸硫胺素、65份肌糖、100份蔗糖、3份溴甲酚紫和0.4份吲哚-3-乙酸配制成完全培养基；

(3)向步骤(2)中的完全培养基加入200份琼脂，并调整培养基的pH值为5.8；

(4)室温下对培养基进行搅拌混合，然后进行分装并进行高压蒸汽灭菌，其中灭菌条件压强为103.0kPa，温度为130℃，反应时间为15min，高压蒸汽灭菌后制备得到所需的甘薯茎尖脱毒用固体培养基。

上面对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。