[发明专利]一种利用磁性固定化碱性蛋白酶提取虾壳蛋白的方法

权利要求书

1.一种利用磁性固定化碱性蛋白酶提取虾壳蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：

1.1、制备磁性固定化碱性蛋白酶：

1.1.1、将磁性壳聚糖微球加入pH＝9-12的硼砂缓冲液中，再加入碱性蛋白酶，磁性壳聚糖微球、碱性蛋白酶和硼砂缓冲液的比例为1mg:100-400U:0.1-1ml，在0-10℃下反应2-5h，得到混合产物；

1.1.2、向混合产物中加入戊二醛，使戊二醛的终浓度为0.005-0.01g/ml，在0-10℃下反应2-5h，过滤，将滤渣用硼砂缓冲液洗涤，干燥，得到磁性固定化碱性蛋白酶；

1.2、提取虾壳中的蛋白：

1.2.1、将虾壳粉加入到浓度为50-90g/L乙酸溶液中，虾壳粉与乙酸溶液的质量体积比为1g:6-14ml，在55-75℃下反应1-5h，得混合液；

1.2.2、将混合液过滤，向滤渣中加入碱性溶液至体系呈中性，过滤，再用蒸馏水洗涤滤渣，干燥，得改性虾壳粉；

1.2.3、测定改性虾壳粉中虾壳蛋白的含量；

1.2.4、将改性虾壳粉加入到pH为9-12的硼砂缓冲液中，接着加入磁性固定化碱性蛋白酶，磁性固定化碱性蛋白酶与虾壳蛋白的比例为10-20U:1mg，在温度为45-60℃下搅拌酶解1-5小时，酶解结束后，用吸铁石分离出磁性固定化碱性蛋白酶，将分离出的磁性固定化碱性蛋白酶洗涤后保存备用，再将所得的酶解液过滤，将滤液冷冻干燥，得到虾壳蛋白多肽，即为虾壳蛋白粉。

2.根据权利要求1所述的利用固定磁性固定化碱性蛋白酶提取虾壳蛋白的方法，其特征在于：所述的碱性蛋白酶比活力为20000-32000U/mL。

3.根据权利要求1所述的利用固定磁性固定化碱性蛋白酶提取虾壳蛋白的方法，其特征在于：所述的碱性溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。