[发明专利]DMGDH基因多态性检测用试剂体系和试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种二甲基甘氨酸脱氢酶基因多态性检测用试剂体系，其特征在于，所述试剂体系包括特异性引物和限制性内切酶，所述特异性引物如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述限制性内切酶的酶切位点为SEQ ID NO.3所示序列的第301位与第302位之间。

2.根据权利要求1所述的试剂体系，其特征在于，所述限制性内切酶包括SspI酶。

3.根据权利要求1或2所述的试剂体系，其特征在于，所述试剂体系还包括缓冲液和dNTPs，所述缓冲液的组成包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钾和氯化镁。

4.根据权利要求1-3任一项所述的试剂体系，其特征在于，所述试剂体系还包括DNA聚合酶，优选TaqDNA聚合酶。

5.一种二甲基甘氨酸脱氢酶基因多态性检测用试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1-4任一项所述的试剂体系。

6.特异性引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2以及酶切位点为SEQ ID NO.3所示序列的第301位与第302位之间的限制性内切酶在制备二甲基甘氨酸脱氢酶基因多态性检测用试剂体系或试剂盒中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述二甲基甘氨酸脱氢酶基因多态性检测用试剂体系或试剂盒的使用方法包括以下步骤：

(1)获取样本DNA；

(2)利用特异性引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2对步骤(1)获取的样本DNA进行PCR扩增，得到扩增产物；

(3)利用酶切位点为SEQ ID NO.3所示序列的第301位与第302位之间的限制性内切酶与步骤(2)的扩增产物进行酶切反应；

(4)将步骤(3)的反应产物进行电泳。

8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述限制性内切酶包括SspI酶。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，步骤(2)得到的扩增产物序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。

10.根据权利要求7-9任一项所述的应用，其特征在于，步骤(3)所述的酶切反应温度为37～39℃中的任一种温度，恒温反应3～5小时。