[发明专利]一种针对亚洲乳腺癌21基因检测方法

权利要求书

1.一种针对亚洲乳腺癌21基因检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：样本采集

以标准的医疗样本采集流程收集冰冻的新鲜癌症组织样本；

S2：实时荧光定量PCR技术检测基因的表达量数值

选取目的基因共21个基因，包括16个肿瘤相关基因和5个参考基因，其中肿瘤相关基因包括：HER2相关基因有GRB7、ERBB2，雌激素相关基因有ESR1、PGR、BCL2、SCUBE2，增殖相关基因有BIRC5、MKI67、CCNB1、MYBL2、AURKA，侵袭相关基因有MMP11、CTSL2，另外还包括GSTM1、CD68、BAG1，对所选目的基因按照操作手册依次进行cDNA合成和实时荧光定量PCR，获得21基因表达量数值；

S3：风险值的计算

首先对基因表达值标准化处理，使基因表达值在0到15之间，其计算公式为：

gene_x＝(x_i-Min_gene)*15/(Max_gene-Min_gene)

gene_x表示标准化后到值，x_i表示实验测出来的表达值，Min_gene是此基因在已有患者中的最小表达值，Max_gene是此基因在已有患者中的最大表达值；

根据上述步骤计算复发风险值，计算各组别算法如下：

HER2分组值＝0.9*GRB7+0.1*HER2，如果结果小于8，把分值设为8；

雌激素相关基因分值＝(0.8*ESR1+1.2*PGR+BCL2+SCUBE2)/4；

增殖相关基因组分值＝(BIRC5+MKI67+MYBL2+CCNB1+AURKA)/5，如果结果小于6.5，把分值设为6.5；

侵袭相关基因组分值＝(CTSL2+MMP11)/2，其中各基因名代表此基因表达量；

未矫正的复发风险值设为RSU，由以下公式推导：

RSU＝+0.47*HER2分组值-0.34*雌激素相关基因分值+1.04*增殖相关基因组分值+0.10*侵袭相关基因组分值+0.05*CD68-0.08GSTM1-0.07*BAG1；

矫正的复发风险值设为RS_R，由以下公式推导：

如果RSU在0和100范围内，RS_R＝20*(RSU)；

如果RSU小于0，RS_R＝0；

如果RSU大于100，RS_R＝100；

最终的复发风险值设为RS，由以下公式推导：

如果RS_R小于18，RS＝0；

如果RS_R在18和31范围内，RS＝0.5；

如果RS_R大于31，RS＝1；

结果评估：RS为0，属于低风险范围，复发风险低，化疗获益小；RS为1属于高风险范围，复发风险高，化疗获益高；RS为0.5属于中风险范围；RS_R值越大，平均远处复发率越高。

2.根据权利要求1所述的一种针对亚洲乳腺癌21基因检测方法，其特征在于，所述步骤S2中进行实时荧光定量PCR技术检测前设置RNA质检。

3.根据权利要求1所述的一种针对亚洲乳腺癌21基因检测方法，其特征在于，所述步骤S2中进行实时荧光定量PCR技术检测前设置cDNA质检。

4.根据权利要求1所述的一种针对亚洲乳腺癌21基因检测方法，其特征在于，所述步骤S2中的参考基因为ACTB、GAPDH、RPLPO、GUS、TFRC。