[发明专利]一种胰激肽原酶及其制备工艺

说明书

本发明涉及一种胰激肽原酶及其制备工艺，胰激肽原酶的制备步骤为：冻猪胰脏解冻、绞碎、磨制、预处理、纤维分离、活化、活化胰浆过滤、醇沉、重相压滤、制粒等19个步骤，最终获得胰激肽原酶。本发明实现了胰脏中胰激肽原酶和弹性蛋白酶充分激活，为胰激肽原酶及胰弹性蛋白酶进一步联产创造可能性；本发明中所得胰激肽原酶中胰弹性酶活力非常高；本发明极大提高了过滤速度，实现工业化生产；本发明采用沸腾干燥方式，投资小、耗时短、活力损耗小。

技术领域

本发明涉及一种胰激肽原酶及其制备工艺，属于胰激肽原酶的制备技术领域。

背景技术

胰激肽原酶又称胰激肽释放酶、血管舒缓素，其普遍存在于人体的胰脏、颌下腺与唾液中，其中以胰脏中含量最高。现有技术中，胰激肽原酶是从猪胰腺中提取的蛋白水解酶类，由18中氨基酸和4种糖所组成，为一种内切蛋白水解酶类，分子量为26800，在生物体内，该酶是以酶原，即激肽释放酶原形式存在的。

目前市场上胰激肽原酶基本都是从胰脏中直接提取的。先把胰脏绞碎，再用醋酸缓冲液把胰激肽原酶从胰脏中提取出来。新鲜胰脏必须先去除脂肪和结缔组织，经过机械破碎，再用有机溶剂除去大部分脂溶性杂质后才能用水提取。对于冰冻的胰脏，还要经过刨切机将胰脏刨切成片状或丝状，然后再进行捣碎、研磨、匀浆等操作；其次是胰脏中的酶均是以无活性的酶原形式存在，还需采用多种活化剂在适当条件下对其活化。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胰激肽原酶及其制备工艺，本发明首先把胰脏中胰激肽原酶激活，再从中分离出来，解决了现有技术中胰激肽原酶不能规模化生产中的难题。本发明的技术方案如下：

一种胰激肽原酶的制备工艺，具体步骤如下：

(1)冻猪胰脏解冻

冻猪胰脏在无菌的解冻间解冻架上解冻至半化状态，保证胰脏中心温度≤0℃，解冻间温度为15-20℃，空气相对湿度≥80％RH；

解冻间用臭氧进行消毒、解冻架等工器具用热碱水或二氧化氯消毒液消毒。

原料在转运过程中应避免污染，不得接触地面等污染源(托盘等工器具应事先消毒)。

(2)绞碎

将解冻后的猪胰脏在切绞一体机中进行切绞，切绞过程猪胰脏浆的温度≤10℃。

切绞一体机的消毒：采用热碱水或二氧化氯消毒液对切绞一体机进行消毒。

(3)磨制

将绞碎的猪胰脏浆置于无菌的磨机中，进行磨浆，经两台串联胶体磨机研磨两遍后送入1号提取罐，边搅拌边加入胰脏活化液、碳酸氢钠和乳酸，转速为30HZ；胰脏活化液、碳酸氢钠、乳酸的终浓度(质量浓度)分别为5-10％、0.01％和0.05％；

优选的，胰脏活化液、碳酸氢钠、乳酸的终浓度(质量浓度)分别为8.5％、0.01％和0.05％。

使用完毕的磨机清洗消毒。先用清水(或结合毛刷等工具)清洗干净，再用热碱水消毒10min以上，最后用热水(85℃)冲洗干净。

(4)预处理

物料在1号提取罐中搅拌5min后，缓慢升温5小时，使物料温度升至36-48℃，升温过程中间隙搅拌，每小时搅拌一次，每次15min；

优选的，1号提取罐中，搅拌5min后，缓慢升温5小时，使物料温度升至40℃。

(5)纤维分离

将预处理后的物料通过除浆机分离纤维，获得纤维组织和浆液，浆液中不含纤维，然后将浆液打入2号提取罐；

(6)活化