[发明专利]PRRT1基因在制备冠心病诊断产品中的应用

说明书

技术领域

本发明属于分子诊断领域，涉及一种用于冠心病诊断的分子标志物，具体涉及血液中的分子标志物-PRRT1基因在制备诊断冠心病的产品中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化性心脑血管病已成为世界范围关注的主要健康问题。2004年的世界卫生组织(WHO)报告显示，全世界每年心血管疾病以冠心病和脑卒中为主导致的死亡人数达高达1720万，占所有死亡人数的三分之一。预计2020年这一数字将进一步增加50％，高达2500万，心血管疾病是全球人类的“头号杀手”。在中国进行的一项大规模前瞻性研究也显示，心脏疾病已经成为中国人群的主要死亡原因，分列男、女性死亡原因的第2位和第1位。我国每年新发心肌梗死50万人，随着生活方式的改变以及动脉粥样硬化相关的危险因素持续增加，冠心病与心肌梗死发病也还将呈持续上升趋势。

大量的研究资料表明，冠心病是一种复杂疾病，是由多个微效基因与环境因素长期相互作用所致。因此鉴定出与冠心病相关的易感基因或致病基因，在人群中进一步筛选增加疾病风险的易感基因确定易感个体，将有助于冠心病的发病风险预测、新药开发、诊断和个体化治疗。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可用于冠心病早期诊断的分子标志物。相比传统的冠心病的诊断方法，使用基因标志物来诊断冠心病具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了检测PRRT1基因表达的产品在制备诊断冠心病的工具中的应用。

进一步，上面所提到的检测PRRT1基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测PRRT1基因表达水平以诊断冠心病的产品。

进一步，所述用RT-PCR诊断冠心病的产品至少包括一对特异扩增PRRT1基因的引物；所述用实时定量PCR诊断冠心病的产品至少包括一对特异扩增PRRT1基因的引物；所述用免疫检测诊断冠心病的产品包括：与PRRT1蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断冠心病的产品包括：与PRRT1基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断冠心病的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与PRRT1蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与PRRT1基因的核酸序列杂交的探针。

在本发明的具体实施方案中，所述用实时定量PCR诊断冠心病的产品至少包括一对特异扩增PRRT1基因的引物的序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

优选地，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台。其中，高通量测序平台是一种特殊的诊断工具，检测PRRT1基因表达的产品可以应用于该平台实现对PRRT1基因的表达情况的检测。随着高通量测序技术的发展，对一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知PRRT1基因的异常与冠心病相关也属于PRRT1基因的用途，同样在本发明的保护范围之内。

本发明还提供了一种诊断冠心病的工具，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。

其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测PRRT1基因转录水平的针对PRRT1基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的PRRT1蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括PRRT1基因在内的多个基因(例如，与冠心病相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括PRRT1蛋白在内的多个蛋白质(例如与冠心病相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与冠心病的标志物同时检测，可大大提高冠心病诊断的准确率。

其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测PRRT1基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括PRRT1蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测PRRT1基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对PRRT1基因的引物和/或探针。根据PRRT1基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测PRRT1基因表达水平的引物和探针。