[发明专利]一种羰基还原酶、突变体及其在制备他汀合成中间体中的应用

权利要求书

1.一种羰基还原酶，其特征在于，所述羰基还原酶是具有如下序列的蛋白质：

(1)具有SEQ ID No.2所示氨基酸序列；

(2)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为丙氨酸；

(3)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第198位的缬氨酸替换为异亮氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(4)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸，第243位的缬氨酸替换为异亮氨酸；

(5)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第154位的甲硫氨酸替换为异亮氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(6)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第96位的缬氨酸替换为天冬氨酸，第97位的天冬酰胺替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(7)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第39位的天冬酰胺替换为缬氨酸，第40位的组氨酸替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(8)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第96位的缬氨酸替换为天冬氨酸，第97位的天冬酰胺替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为丙氨酸，第243位的缬氨酸替换为异亮氨酸；

(9)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为天冬氨酸，第202位的丙氨酸替换为亮氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(10)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为组氨酸，第202位的丙氨酸替换为异亮氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(11)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为天冬氨酸，第202位的丙氨酸替换为缬氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(12)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第201位的甘氨酸替换为组氨酸，第202位的丙氨酸替换为亮氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(13)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第154位的甲硫氨酸替换为异亮氨酸，第155位的丙氨酸替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(14)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第154位的甲硫氨酸替换为丝氨酸，第155位的丙氨酸替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(15)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第154位的甲硫氨酸替换为缬氨酸，第155位的丙氨酸替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为丙氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(16)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第198位的缬氨酸替换为异亮氨酸，第201位的甘氨酸替换为天冬氨酸，第202位的丙氨酸替换为亮氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸；

(17)将如序列表中SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第154位的甲硫氨酸替换为异亮氨酸，第155位的丙氨酸替换为天冬氨酸，第201位的甘氨酸替换为天冬氨酸，第202位的丙氨酸替换为亮氨酸，第204位的天冬氨酸替换为赖氨酸。

2.一种分离的核酸，其特征在于，所述的核酸是编码如权利要求1所述羰基还原酶的核酸分子。

3.一种重组表达载体，其特征在于，其包含如权利要求2所述的核酸序列。

4.一种重组表达转化体，其特征在于，其包含如权利要求3所述的重组表达载体。

5.一种重组羰基还原酶催化剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括：培养如权利要求4所述的重组表达转化体，分离表达的重组羰基还原酶。