[发明专利]一种木瓜酶制剂的产业化制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种木瓜酶制剂的产业化制备方法，通过板框过滤与喷雾干燥两步法分离制备木瓜脂肪酶和木瓜蛋白酶，工艺科学、过程易控、材料利用率高，与通过缓冲液反复洗涤去除木瓜乳中的水溶性蛋白酶类的木瓜脂肪酶制备方法相比，产率高，酶活力回收率高，且可以同时提取木瓜脂肪酶和木瓜蛋白酶，水电消耗大大减小，非常适合工业产业化制备。本发明还公开了一种将制得的木瓜脂肪酶应用于酶解奶味香基制备的方法，将一定比例的稀奶油、PBS缓冲液、单硬脂酸甘油酯混合，在60‑80℃下充分搅拌乳化后，加入木瓜脂肪酶在30‑60℃下进行酶解，最后升温至85‑90℃灭酶30min后既得木瓜脂肪酶酶解奶味香基，其具有风味独特，可以用于调制独特风味的奶味产品。

技术领域

本发明涉一种脂肪酶的产业化制备方法及其应用，具体涉及一种木瓜酶制剂的产业化制备方法及其应用。

背景技术

木瓜乳中具有木瓜蛋白酶，木瓜肽酶B，木瓜凝乳蛋白酶A，木瓜凝乳蛋白酶B等丰富的酶类，其中木瓜蛋白酶已被广泛的应用于食品、医药、日化等行业。1991年Giordani等首先报道了木瓜乳具有水解甘油三脂的功能，并且发现其具有水解功能的主要成份是番木瓜乳中的水不溶的成分即木瓜脂肪酶(Carica papaya lipase，CPL)。因为它与木瓜中的水不溶的类似于橡胶的物质以矩阵的形式嵌和，人们称之为“天然固定化酶”。

目前，CPL是木瓜蛋白酶生产的副产物，CPL以固体形式存在降低了木瓜蛋白酶的纯度。CPL不仅存在于木瓜乳中，也存在于番木瓜树的枝和叶中。由于病毒和细菌等疾病，番木瓜树必须在1到2年间翻新种植，造成世界范围类的7百万吨的废弃物，严重的影响环境，因此，对这些废弃物进行深度开发、产业化回收提取木瓜酶制剂，特别是木瓜脂肪酶，并积极拓展其应用，具有重要的经济价值和环保价值。

目前较为常用的CPL的提取方法，主要是通过缓冲液反复洗涤去除木瓜乳中的水溶性蛋白酶类，离心回收CPL，CPL的得率为木瓜乳重量的2.50％左右，脂肪酶酶活为350U/g左右。该方法虽然可以完全去除木瓜乳中的水溶性的酶类，但是需要耗费大量的水电，且处理量小，一般仅适用于实验室及样品试制，难以适应产业化制备的要求。同时，该方法将水溶性蛋白酶类有效成分作为废弃物，造成较大的资源浪费。

奶味香基是具有奶香气的添加剂，是食品工业中使用最为广泛的食用香精之一，主要用于糖果、蜜饯、饮料、冰淇淋及焙烤食品等的增香。此外，奶味香基还可用于饲料工业中。CPL目前已经被报道应用于催化合成人造母乳替代物，结构酯，芳香酯，生物柴油和药物中间体的手性拆分等，但是尚未有将CPL应用于产业化制备奶味香基的报道。

酶法制备奶味香基主要是指以稀奶油、牛奶等为原料，通过脂肪酶的作用将甘油三酯酶解成饱和及不饱和脂肪酸、酮酸和羟酸，形成多种风味成分的前体物质，经过自然的氧化、断裂、内酯化等反应生成一系列风味物质。因此以奶油为原料，通过脂肪酶水解作用得到酶解奶油，再加以适当修饰，即可得到天然奶味香精。脂肪酶已被报道应用于制备奶味香基，尤其是诺维信生产的商品酶Palatase20000L。同时，脂肪酶，蛋白酶和其它酶复配的复合酶制剂对提高奶味香基的香气丰度具有重要的作用。

发明内容

本发明是针对现有技术中的不足，而提供一种木瓜酶制剂的产业化制备方法及其应用，实现木瓜脂肪酶的规模化工业生产，生产工艺紧凑、过程易控、综合能耗低，产品质量稳定，可以使用同一批原材料得到的木瓜脂肪酶和木瓜蛋白酶，且大幅提高酶制剂的得率和酶活。

本发明还提供了木瓜脂肪酶应用于天然奶味香基制作的方法，将木瓜脂肪酶应用于天然奶基的制备中，实现具有独特香味的天然香精的制备。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种木瓜酶制剂的产业化制备方法，包括以下步骤：