[发明专利]一种基于共线性基因开发标记鉴定大白菜-结球甘蓝易位系的方法有效
申请号: | 201710004003.6 | 申请日: | 2017-01-04 |
公开(公告)号: | CN106701952B | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 轩淑欣;苏建辉;申书兴;赵建军;王彦华;马聪 | 申请(专利权)人: | 河北农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 071000 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 线性 基因 开发 标记 鉴定 大白菜 甘蓝 易位 方法 | ||
1.一种基于共线性基因开发标记鉴定大白菜-结球甘蓝易位系的方法,其特征在于,包括:
a)确定大白菜-结球甘蓝易位系中结球甘蓝的基因片段区段;
获得所述结球甘蓝的基因片段区段及其侧翼区域所有基因序列,以及大白菜中对应的共线性基因序列,并根据共线性基因序列的差异位点设计覆盖差异位点区域的引物;
b)利用上述设计的引物分别对易位系亲本大白菜和亲本结球甘蓝进行PCR扩增,根据扩增结果确定结球甘蓝相对于大白菜特异的基因标记,所述基因标记满足以下条件:结球甘蓝有扩增产物但大白菜没有扩增产物;或者二者均有扩增产物,但扩增条带的位置不同;
c)利用上述基因标记,分别对易位系亲本大白菜、亲本结球甘蓝和易位系自交后代进行PCR扩增,根据扩增结果获得易位系的鉴定结果;
所述结球甘蓝的基因片段区段及其侧翼区域为结球甘蓝C03染色体上游154444bp到1814490bp及其侧翼20kb的区域;
所述基因标记选自以下基因序列中的一组或多组:SEQ ID No. 1+SEQ ID No. 2、SEQID No. 3+SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5+SEQ ID No. 6、SEQ ID No. 7+SEQ ID No. 8、SEQID No. 9+SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11+SEQ ID No. 12、SEQ ID No. 13+SEQ ID No.14、SEQ ID No. 15+SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 17+SEQ ID No. 18、SEQ ID No. 19+SEQID No. 20、SEQ ID No. 21+SEQ ID No. 22、SEQ ID No. 23+SEQ ID No. 24、SEQ ID No.25+SEQ ID No. 26、SEQ ID No. 27+SEQ ID No. 28、SEQ ID No. 29+SEQ ID No. 30、SEQID No. 31+SEQ ID No. 32、SEQ ID No. 33+SEQ ID No. 34、SEQ ID No. 35+SEQ ID No.36、SEQ ID No. 37+SEQ ID No. 38、SEQ ID No. 39+SEQ ID No. 40、SEQ ID No. 41+SEQID No. 42、SEQ ID No. 43+SEQ ID No. 44、SEQ ID No. 45+SEQ ID No. 46、SEQ ID No.47+SEQ ID No. 48、SEQ ID No. 49+SEQ ID No. 50、SEQ ID No. 51+SEQ ID No. 52、SEQID No. 53+SEQ ID No. 54、SEQ ID No. 55+SEQ ID No. 56、SEQ ID No. 57+SEQ ID No.58、SEQ ID No. 59+SEQ ID No. 60、SEQ ID No. 61+SEQ ID No. 62、SEQ ID No. 63+SEQID No. 64、SEQ ID No. 65+SEQ ID No. 66、SEQ ID No. 67+SEQ ID No. 68、SEQ ID No.69+SEQ ID No. 70、SEQ ID No. 71+SEQ ID No. 72、SEQ ID No. 73+SEQ ID No. 74、SEQID No. 75+SEQ ID No. 76、SEQ ID No. 77+SEQ ID No. 78、SEQ ID No. 79+SEQ ID No.80、SEQ ID No. 81+SEQ ID No. 82、SEQ ID No. 83+SEQ ID No. 84、SEQ ID No. 85+SEQID No. 86、SEQ ID No. 87+SEQ ID No. 88、SEQ ID No. 89+SEQ ID No. 90、SEQ ID No.91+SEQ ID No. 92、SEQ ID No. 93+SEQ ID No. 94、SEQ ID No. 95+SEQ ID No. 96、SEQID No. 97+SEQ ID No. 98或SEQ ID No. 99+SEQ ID No. 100。
2.根据权利要求1所述的鉴定方法,其特征在于,所述步骤a)中,利用InDel标记法确定大白菜-结球甘蓝易位系中结球甘蓝的基因片段区段。
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