[发明专利]用于制备包含因子VIII的冷冻干燥微丸的方法

说明书

用于制备包含因子VIII的冷冻干燥微丸的方法，所述方法包括下列步骤：a)冷冻包含因子VIII的溶液的微滴以形成微丸；b)冷冻干燥所述微丸；其中在步骤a)中，微滴借助于使包含因子VIII的溶液进入冷却塔形成微滴来产生，所述冷却塔具有温度可控的内壁表面和溶液的冷冻温度以下的内部温度，和其中在步骤b)中，在位于真空室内的旋转容器中冷冻干燥微丸。

本发明涉及用于制备包含因子VIII的冷冻干燥微丸的方法，所述方法包括以下步骤：a) 冷冻包含因子VIII的溶液的微滴以形成微丸；和b) 冷冻干燥所述微丸。

因子VIII (FVIII)是血浆中发现的一种蛋白质，在导致血液凝固的反应级联中起辅助因子的作用。血液中FVIII活性量的缺乏导致称为血友病A的凝血障碍，这是一种主要影响男性的遗传疾病状态。目前用衍生自人血浆的或使用重组DNA技术制造的FVIII的治疗性制剂治疗血友病A。针对出血事件施用这种制剂(按需治疗)或以频繁、规律的时间间隔施用这种制剂以防止不受控制的出血(预防)。

用于制造和包装肠胃外生物药品的常规工艺包括根据用于配制本体溶液的中间材料的测量的生物活性配制本体溶液。在许多情况下，特别是在该工艺结束时，将本体溶液冷冻并储存以进行测定。为此目的，冷冻溶液可以储存数日或甚至数周。为了随后填充最终的包装(例如小瓶)以分配给最终用户，通常将冷冻的中间溶液解冻、膨胀并填充入小瓶中，然后在小瓶内冷冻干燥。

基于中间溶液的测定来计算填充到最终包装小瓶中的解冻本体溶液的量。由于(1)生物测定的变化大，以及(2)随后的无菌填充和冷冻干燥过程中的产率损失，该计算通常包含大的安全界限。产率损失是由于在该第一次冷冻、储存和解冻步骤以及随后的第二次填充、冷冻和干燥工艺中的产品压力造成的。这个计算当然是非常困难的，并且基于完整工艺的产品依赖性经验知识。

在常规工艺中，冷冻干燥通常在不具有温度控制壁的标准冷冻干燥室中进行。不幸的是，这些干燥机向放置在干燥室中的小瓶提供不均匀的热传递。尤其是那些位于边缘的小瓶由于室壁与板/架堆之间的间隙中的辐射热交换和自然对流而比位于板中心的小瓶更能集中地交换能量。这种不均匀的能量分布导致在边缘处的小瓶和在中心处的小瓶之间的冷冻和干燥动力学的变化，并且可能导致相应小瓶的活性内容物的活性变化。为确保最终产品的一致性，有必要在实验室和生产规模上都进行广泛的开发和验证工作。

出版物(Wang, D. Q., MacLean, D.和Ma, X. (2010), 标题为生物药品冷冻干燥中的工艺稳健性(Process Robustness in Freeze Drying of Biopharmaceuticals),于用于制备生物药品的制剂和工艺开发策略(Formulation and Process DevelopmentStrategies for Manufacturing Biopharmaceuticals) (F. Jameel和S. Hershenson编辑), John Wiley Sons, Inc., Hoboken, NJ, USA中)公开了用于重组FVIII的特定冷冻干燥循环，但仍认识到根据冷冻干燥室中小瓶位置的效价变化。

WO 2010/054238 A1报道了因子VIII (FVIII)的稳定冻干药物制剂，其包含：(a)FVIII；(b) 一种或多种缓冲剂；(c) 一种或多种抗氧化剂；(d) 一种或多种稳定剂；和(e)一种或多种表面活性剂；所述FVIII包含选自以下的多肽：a) 重组FVIII多肽；b) a)的生物活性类似物、片段或变体；所述缓冲剂由约0.1 mM至约500 mM范围内的pH缓冲剂组成且所述pH范围为约2.0至约12.0；所述抗氧化剂的浓度为约0.005至约1.0 mg/ml；所述稳定剂的浓度为约0.005至约20％；所述表面活性剂的浓度为约0.001％至约1.0％；并且所述制剂不包含氯化钠(NaCl)或仅包含痕量的NaCl。