[发明专利]羧基官能亲水微珠的偶合

说明书

一种聚合物基质，如聚合物涂料或聚合物水凝胶网络，含有可用作偶合位点的羧基基团，受体或分析物分子可附接于所述位点。在一个实例中，所述聚合物基质包括具有链烷酸基团或其衍生物的聚丙烯酰胺聚合物网络，所述聚合物基质可与羧基活化化合物反应以在所述聚丙烯酰胺网络上提供活化的链烷酸酯基团。胺封端的核酸可与所述活化的链烷酸酯基团反应，通过烷基酰胺基团将所述核酸捕获到所述聚合物网络上。

技术领域

本发明一般涉及羧基官能亲水微珠的偶合方法以及用该方法形成的微珠。

背景技术

官能化聚合物基质被用于各种化学应用和生物应用。具体而言，表面和聚合物微珠上的聚合物涂料可用于各种分离技术中，或辅助检测化学体系和生物体系中的分析物。例如，聚合物微粒已用于色谱技术，以分离溶液中的目标分子。再如，具有一个磁性涂层的聚合物微粒已用于磁分离技术。最近，聚合物微粒已用以增强ELISA类技术并可用于捕获多聚核苷酸。

这些分离和分析技术有赖于所述聚合物基质的官能化，以吸引期望的目标分析物。既往的基质已遇到表面官能化不良的问题，或难以控制官能化位点的个数。官能化不良可导致分析物捕获减少或所捕获的分析物的表达水平下降，无论是因为缺少位点、位点接触不良还是因为其它空间位阻。对磁分离技术而言，分析物捕获的变化可导致分离效率降低。对色谱技术和各种多聚核苷酸捕获技术而言，官能化程度的变化可导致与多聚核苷酸相互作用的可供位点个数的变化，致使捕获、分离效率或检测改变。

发明概述

在一个示例性实施例中，一种聚合物基质，诸如一种聚合物涂料、一个聚合物水凝胶网络或一种聚合物微珠，包括可用作偶合位点的羧基基团，受体或分析物分子可附接于所述位点。在一个具体实例中，所述聚合物基质包括一个具有链烷酸基团或其衍生物的聚丙烯酰胺聚合物网络，所述链烷酸基团或其衍生物可在一种非水溶剂中与诸如一种琥珀酰亚胺基脲鎓化合物或一种琥珀酰亚胺基鏻化合物等羧酸酯活化化合物反应，在所述聚丙烯酰胺网络上提供活化的链烷酸酯基团，诸如琥珀酰亚胺基酯。诸如胺封端的寡核苷酸等亲脂性胺封端的核酸可在非水溶剂中与所述活化的链烷酸酯基团反应，通过烷基酰胺基团将所述核酸捕获到所述聚合物网络上。

附图简略说明

对于本领域技术人员而言，通过参考所述附图，可以更好地理解本发明，并明了本发明的多个特征和优点。

图1包括一个流程框图，图示说明一种用于偶合基质与检测分析物的示例性方法。

图2、图3、图4、图5和图6包括对示例性化学方案的图示说明。

图7包括有关示例性测序方法的图。

在不同的附图中使用相同的引用符号表示相似或相同的事项。

具体实施方式

在一个示例性实施例中，一种聚合物基质，如一种聚合物涂料、一个聚合物水凝胶网络或一种不连续的聚合物微粒，包括可用作偶合位点的羧基基团，受体或分析物分子可附接于所述位点。在一个具体实例中，所述聚合物基质包括一个具有链烷酸基团或其酯衍生物的聚丙烯酰胺聚合物网络，所述链烷酸基团或其酯衍生物可在一种非水溶剂中与诸如琥珀酰亚胺基脲鎓化合物或一种琥珀酰亚胺基鏻化合物等羧基活化化合物反应，提供位于所述聚丙烯酰胺网络上的活化的链烷酸酯基团。诸如胺封端的寡核苷酸等亲脂性胺封端的核酸可在一种非水溶剂中与所述琥珀酰亚胺基链烷酸酯基团反应，通过一个烷基酰胺基团将所述核酸捕获到所述聚合物网络上。