[发明专利]锌结合的谷胱甘肽S转移酶与金属硫蛋白融合蛋白

说明书

本发明涉及一种新型的锌结合融合蛋白，其为与锌结合的谷胱甘肽S转移酶(GST)与金属硫蛋白(MT)的融合蛋白，其提供预防或治疗ROS‑关联疾病以及重金属中毒的功效。

技术领域

本发明涉及一种新型锌结合融合蛋白，尤其是一种包含谷胱甘肽S转移酶与金属硫蛋白的锌结合融合蛋白。

背景技术

金属硫蛋白(MT)是普遍存在的低分子量蛋白质，且是具有极高金属及半胱氨酸含量且可形成金属-硫醇丛集的多胜肽。MT基因族群含有4个亚群，称为MT1至MT4。越来越多的证据显示哺乳动物MT1/MT2异构物参与锌的恒定性，且对重金属毒性及氧化压力有防护作用。MT3主要表达于神经元，但也可表达于神经胶质细胞；MT4则大部分存在于分化中的多层鳞状上皮细胞。

Vallee及Margoshe揭露由纯化来自马(马的)肾皮质的Cd-结合蛋白的MT(MargoshesVallee,“A cadmium protein from equine kidney cortex”.Journal ofthe American Chemical Society 79(17):4813–4814,1957)。有四个主要的异构物在人类中表达(族群1，参见下图)：MT1(亚型：A、B、E、F、G、H、L、M、X)、MT2、MT3、MT4。可在不同的哺乳动物组织中发现不同的MT异构物。例如，MT1及MT2一般在所有器官中发现，MT4主要表达于分层的组织，但MT3则主要存在于大脑中。MT3还称为生长抑制因子(GIF)。

MT在转录因子的调控上扮演重要的角色，因此细胞恶性转化以及最终的癌症可能因MT的功能或表达上的问题而造成(Krizkova et al.,“Metallothionein--a promisingtool for cancer diagnostics”.Bratisl Lek Listy 110(2):93–7,2009.)。据发现，在某些乳腺、结肠、肾脏、肝脏、皮肤(黑色素瘤)、肺脏、鼻咽、卵巢、前列腺、口腔、唾腺、睪丸、甲状腺以及膀胱的癌症中，MT的表达量增加；而在肝细胞癌及肝腺癌中，MT的表达量减少(Cherian,“Metallothioneins in human tumors and potential roles incarcinogenesis”.Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms ofMutagenesis 533:201–209,2003.)。

文献已提出重金属毒性是自闭症的一种假定病因，以及MT合成的功能障碍。然而，MT功能障碍并没有具体地与自闭症谱系障碍有所关联。根据2006年探讨孩童暴露于疫苗防腐剂硫柳汞的报导指出，相比于非自闭症孩童而言，在自闭症孩童中MT的含量及针对MT的抗体并无显著差异(SinghHanson,“Assessment of metallothionein and antibodiesto metallothionein in normal and autistic children having exposure tovaccine-derived thimerosal”.Pediatr Allergy Immunol 17(4):291–6,2006.)。

因此，有需要发展一种符合现有技术要求且关联于金属硫蛋白的新型融合蛋白，从而提供新的诊断或治疗试剂。

发明内容

本发明是基于非预期性地发现一种锌结合融合蛋白，其为一种与锌结合的谷胱甘肽S转移酶(GST)与金属硫蛋白(MT)的融合蛋白，其在治疗活性氧族群(ROS)关联疾病以及因急性或慢性暴露于重金属下所造成的重金属中毒上，提供非预期性的优异治疗效果。

因此，本发明的一方面提供一种锌结合的GST与MT融合蛋白(GST-MT-Zn)。

在本发明的一个实施例中，该GST-MT-Zn是GST-MT3-Zn。