[实用新型]一种马铃薯病毒快速检测试纸条有效
申请号: | 201621330258.9 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN206208905U | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 刘卫平;李志新;张微;张莹莹;张新宇 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省农业科学院克山分院 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 161005 黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 马铃薯 病毒 快速 检测 试纸 | ||
技术领域
本实用新型涉及利用免疫层析技术检测植物病毒技术领域,具体涉及一种马铃薯病毒快速检测试纸条。
背景技术
马铃薯是我国应用价值较高的经济作物,己被列为我国7大作物之一,也是中国西部最重要的作物品种和主要的支柱型产业,发展势头良好,但目前我国马铃薯单产却远远低于发达国家,马铃薯病毒是造成马铃薯产量低、质量差的主要原因。在中国的医学检验如早孕、乙肝、寄生虫、性病的检验和动物疫病的检验如禽病诊断、家畜疫病、小鼠肝炎病毒、猪旋毛虫病、犬病病毒的诊断中有免疫层析试纸条的应用;在烟草、南瓜、莴苣、黄瓜花叶病毒、番茄环斑病毒、烟草环斑病毒、烟草脉带病毒、柑橘溃疡病菌、葫芦科病毒、莴苣丛枝植原体的检测中已有免疫层析试纸条的应用,但在马铃薯作物中还没有田间快速检测试纸条的应用。
常规的检测马铃薯病毒的技术是双抗体夹心酶联免疫吸附试验法,该方法需要专门的技术人员在专门的实验室利用专门的设备进行实验,操作过程繁琐,实验时间长:1.5-2天。不能现场取样,现场出结果。目前生产上普遍采用马铃薯脱毒种薯来防治病毒病的危害,为确保马铃薯原原种、原种的脱毒质量,建立快速、准确、灵敏、高效的马铃薯病毒类病毒检测技术是马铃薯种薯生产的关键技术环节。
通过检索发现如下与本专利相关的专利公开文献:
1、公开号为CN 103757138B的专利公开了一种云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种病毒的检测方法。本实用新型通过对云南马铃薯主栽品种丽薯6号、云薯401、宣薯2号病株中马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒和马铃薯卷叶病毒4种特异性混合抗体诱捕病样中病毒,不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合,同时设置健康马铃薯随机引物cDNA产物相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照,从而快速、准确、灵敏的应用于检测田间马铃薯植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等方面。
2、公开号为CN 103757138B的专利涉及两步法双重RT一PCR同步检测马铃薯Y病毒、马铃薯卷叶病毒,三重RT一PCR同步检测马铃薯X病毒、马铃薯A病毒、马铃薯S病毒的方法及检测试剂盒,是专门针对马铃薯产业影响较大的5种马铃薯病毒而建立的一种同步检测2或3种病毒的快速方法,检测时间仅用4h,且灵敏度高、特异性强、稳定可靠。该方法克服了现有对马铃薯病毒病依据症状学的常规诊断方法误判率较高、血清学方法难以检测休眠马铃薯中的病毒及病毒含量较少的韧皮部病毒—马铃薯卷叶病毒等缺点;该方法适用于马铃薯种苗、种薯多种病毒病的早期诊断,对马铃薯种薯质量监测和病毒病预防有着重要的作用。
通过对比,本专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。
发明内容
本实用新型所要解决的技术问题是为了克服现有方法的不足,将马铃薯病毒快速检测试纸条应用到马铃薯病毒检测中,可实现对样品中马铃薯病毒高特异性、高灵敏度、高准确性、高稳定性的检测,快速检测出马铃薯病毒病的发生情况,为马铃薯脱毒薯种薯级别的定级和马铃薯病毒的防控提供理论依据。
本实用新型的目的是通过以下技术方案实现的:
一种马铃薯病毒快速检测试纸条,包括样品垫1、金标垫 2、NC膜3、检测线T线4、质控线C线5、吸水垫6和PVC底板7,所述PVC底板7的上部贴合有NC膜3,所述NC膜3上部两端分别搭接有金标垫2和吸水垫6,所述金标垫2上部搭接有样品垫1,所述检测线T线4设置在靠近样品垫1的NC膜3表面上,所述质控线C线5 设置在靠近吸水垫6的NC膜3上,所述检测线T线4上包被有马铃薯病毒兔多克隆抗体,所述质控线C线5上包被有马铃薯病毒羊抗兔抗体,所述的金标垫2上结合有胶体金标记物。
而且,马铃薯病毒快速检测试纸条外部还设有卡壳8,所述卡壳8上部表面与样品垫1对应的位置上设有加样孔9,所述卡壳8上部表面与所述NC膜3对应的位置上设有观察槽10。
而且,所述NC膜3与金标垫 2搭接的长度为1-2mm,所述NC膜3与吸水垫6搭接的长度为2-3mm,所述金标垫 2与样品垫1 搭接的长度为2-3mm。
而且,所述包被在质控线C线5上的马铃薯病毒羊抗兔抗体、包被在检测线T线4上的马铃薯病毒兔多克隆抗体和包被结合在金标垫2上的马铃薯病毒胶体金标记物,可以是以下组合中的任意一种:
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