[发明专利]一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法

权利要求书

1.一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：

A、抑稻瘟病菌的菌株的筛选：将新鲜的木樨果清洗、消毒后剔除种子，将果肉部分研磨至匀浆状，果实匀浆用无菌水稀释后涂布于PDA培养基上， 28℃恒温培养箱培养1～2天，挑选单菌落用对峙法筛选出对稻瘟病菌有抑制活性的菌，并选取一株抑菌效果好的备用；

B、抑稻瘟病菌的菌株发酵液制备：将步骤A中选取的抑菌效果好的菌株接种于PDB液体发酵培养基中在28～30℃，120～160rpm摇床恒温培养36～48h，得到发酵液；或是将步骤A中选取的抑菌效果好的菌株接种到PDB种子液培养基培养得到种子液，种子液接种到PDB液体发酵培养基，在28～30℃，120～160rpm摇床恒温培养36～48h，得到发酵液；

C、发酵液制备抑制剂：将步骤B得到的发酵液减压浓缩至膏状，然后加入无水硫酸钠去除水，最后用无水甲醇对膏状物进行洗脱得到洗脱液，收集洗脱液得到稻瘟病菌抑制剂；在步骤C中，所述用无水甲醇对膏状物进行洗脱是加入发酵液体积的 1/50～1/40 的无水甲醇震荡洗脱；所述发酵液减压浓缩条件为42～45℃，25～35mbar；所述无水硫酸钠的加入量为每升发酵液1.5～2.5g无水硫酸钠；每次所述震荡洗脱的时间为8～10min。

2.根据权利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法，其特征在于：在步骤A中，所述的清洗、消毒是将木樨果实依次用60％～85％乙醇、无菌水、0.5％～1.5％的次氯酸钠溶液、无菌水处理。

3.根据权利要求1所述的一种稻瘟病菌抑制剂的制备方法，其特征在于：在步骤B中，所述种子液接种于PDB液体培养基的接种量为2％～4％。