[发明专利]一种纯化制备高品质生物多糖的方法

说明书

本发明公开了一种纯化制备高品质生物多糖的方法。本发明提供的β‑葡聚糖的制备方法包括下述步骤：(1)将裂褶菌发酵液与水混合进行浸煮，得浸煮液；(2)对步骤(1)所述浸煮液进行固液分离，取清液；(3)在步骤(2)得到的清液中加入活性炭，进行吸附处理，得含炭混合物；对所述含炭混合物进行固液分离，取清液；(4)将步骤(3)得到的清液与乙醇混合进行醇析，收集析出的固体；(5)将步骤(4)中所述固体进行干燥，即可得到所述β‑葡聚糖。本发明方法未使用酶解工艺，成本较低。未使用酸解或碱解工艺，不会对β‑葡聚糖的功能性结构造成破坏。制得的β‑葡聚糖溶液粘度大，透光率高，适于各种应用。

技术领域

本发明涉及β-葡聚糖的制备方法，具体涉及一种纯化制备高品质生物多糖的方法。

背景技术

多糖是指一类由10个以上单糖分子聚合而成的天然高分子化合物，广泛分布于动物、植物、微生物(细菌和真菌)和藻类地衣中。多糖作为重要的生物活性物质具有调节免疫、抗肿瘤、降低糖脂、延缓衰老等功效，在医疗保健、食品、动物养殖等领域有着广阔的应用前景。

β-葡聚糖是一种天然多糖。在自然环境中可以找到相当多种类的β-葡聚糖，通常存在于特殊种类的细菌、酵母菌、真菌(灵芝)的细胞壁中，也可存在于高等植物种子的包被中。其中以β-1,3-糖苷键为骨架的蘑菇葡聚糖具有增强免疫力、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等功能，在保湿、抗皱、抗氧化、抗紫外、促进伤口愈合等方面也具有显著效果，此外，与传统的酵母或谷物葡聚糖相比，蘑菇葡聚糖具有更均一稳定的结构、更高的分子质量及更为优良的水溶性。因此高粘度、高透光率的蘑菇β-葡聚糖溶液广泛应用于食品、化妆品及制药领域，制备高粘度、高透光率的蘑菇β-葡聚糖溶液具有重要的意义。

目前，β-葡聚糖的提取方法主要有两种，其一是从燕麦等谷物或蘑菇等子实体真菌中直接提取；其二是通过真菌或细菌的液体发酵，经由对发酵液进行提取加工，以获得β-葡聚糖。发酵法制备β-葡聚糖，纯化时需要除去发酵过程中产生的核酸及蛋白质等杂质，传统方法使用酸碱处理或酶处理来去除核酸和蛋白质，成本高昂且酸碱处理会对葡聚糖造成破坏。

发明内容

本发明的目的是提供一种纯化制备高品质β-葡聚糖的方法，本发明方法操作简便，无需经酸碱及酶解处理，所制备得到的β-葡聚糖溶液具有高粘度、高透光率。

本发明提供的一种β-葡聚糖的制备方法，包括下述步骤：

(1)将裂褶菌发酵液和水混合进行浸煮，得浸煮液；

(2)对步骤(1)所述浸煮液进行固液分离，取清液；

(3)在步骤(2)得到的清液中加入活性炭，进行吸附处理，得含炭混合物；对所述含炭混合物进行固液分离，取清液；

(4)将步骤(3)得到的清液与乙醇混合进行醇析，收集析出的固体；

(5)将步骤(4)中所述固体进行干燥，即可得到所述β-葡聚糖。

上述的制备方法中，步骤(1)中，所述裂褶菌发酵液可采用常规液体发酵方法制备，可为普通发酵条件制备或者发酵条件优化后制备得到的裂褶菌(Schizophyllumcommune Fr.)发酵液。具体可通过如下步骤制备得到：

(a)裂褶菌菌种活化：将马铃薯200g/L、葡萄糖20～30g/L、氯化钠10～20g/L、琼脂15～20g/L制成平板培养基，把裂褶菌菌种接种到该平板培养基上，于20℃～30℃恒温培养箱内培养4～10天得到平板菌丝体；

(b)种子活化：将马铃薯淀粉50～200g/L、葡萄糖20～60g/L、酵母浸膏1～10g/L、酵母浸粉1～10g/L、水制成的液体培养基装入摇瓶，装液量为1/5～1/3，取步骤(a)所得的平板菌丝体接种该摇瓶，于20℃～30℃恒温摇床内100～220rpm震荡培养4～10天，作为种子液；