[发明专利]鼓槌石斛化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种鼓槌石斛的化学小分子成分的相关特征指纹图谱的建立方法，包括：1)对样本容量为n的样本分别进行色谱检测，获取以化学小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作为参照成分的检测数据；2)对样本分别进行指纹图谱检测，获取以鼓槌石斛的全化学成分的指纹图谱峰面积值；3)以色谱数据中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作为响应变量，将指纹图谱中其它成分的峰面积值作为自变量建立分析模型，建立小分子成分与指纹图谱线性回归模型；4)通过变量相关系数指标表征自变量对回归建模的贡献程度，建立化学小分子成分的相关特征指纹图谱。本发明实现了化学小分子成分含量的关联性分析，能有效鉴别、控制以及评价鼓槌石斛药材的质量。

技术领域

本发明属于中药成份检测分析领域，具体涉及一种鼓槌石斛的指纹图谱的分析建模方法。

背景技术

石斛是一种常用的滋补中药，主要为石斛属植物。石斛属植物是兰科植物中最大的一个属，包括铁皮石斛、金钗石斛、密花石斛、鼓槌石斛等多个品种。在全球范围内，约有1100多种石斛，其中在我国发现的有76种。石斛的药用历史悠久。早在古代，石斛在《神农本草经》中就被列为滋补上品，长久以来，随着时代的发展，石斛一直被人们视为珍贵的中草药，具有十分重要的滋补功效。在临床上，石斛被用于治疗多种疾病，具有增强免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌症等药理功效。由于人为长期无节制采挖及不合理利用石斛，其野生资源日趋减少，市场上出现了一些以假乱真、以次充好的现象。此外，由于石斛品种较多，其品种间的杂交使得其近缘的种存在性状交叉现象，分类区别比较困难。因此，有必要建立石斛的特征指纹图谱对石斛鲜品、干品的药材质量进行评价。鼓槌石斛(Dendrobiumchrysotoxum Lindley)：茎直立，肉质，纺锤形，长6cm～30cm，中部直径1.5cm～5cm，具2节～5节间，具多数圆钝的条棱，干后金黄色，近顶端具2枚～5枚叶；叶不下延为抱茎的鞘。总状花序从近茎顶端发出。斜出或稍下垂，长达20cm；花序轴粗壮，疏生多数花；花序柄基部具4枚～5枚鞘；花苞片小，膜质，卵状披针形，长0.2cm～0.3cm，先端急尖；花梗和子房黄色，长达5cm；花质地厚，金黄色，稍带香气；中萼片长圆形，长1.2cm～2cm，中部宽0.5cm～0.9cm，先端稍钝，具7条脉；侧萼片与中萼片近等大；萼囊近球形，宽约0.4cm；花瓣倒卵形，等长于中萼片，宽约为萼片的2倍，先端近圆形，具约10条脉；唇瓣颜色比萼片和花瓣深，近肾状圆形，长约2cm，宽2.3cm，先端浅2裂，基部两侧多少具红色条纹，边缘波状，上面密被短绒毛；唇瓣通常呈倒V型隆起，有时具U形的栗色斑块；蕊柱长约0.5cm；药帽淡黄色，尖塔状。

色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，作为一种全局分析的全景模式，反映的是样品的整体情况,而对单一化学小分子成分的含量解释不具有针对性。迄今为止，有关药用石斛HPLC指纹图谱的专利有1项(CN200810218494.5)，成金乐等对石斛中的酚类和黄酮类成分进行了HPLC指纹图谱分析。此方法适合于酚类和黄酮类这两类成分的质量控制。另一方面，在色谱指纹图谱分析过程中，很多数据都是高维的，即数据包含很多属性或特征，比如有关鼓槌石斛色谱指纹图谱，就能更好地对鼓槌石斛进行描述，但在实际应用中对高维数据直接进行操作将会面临“维数灾难”的问题，“维数灾难”会导致建模过程所需要的样本数随着维数升高而呈指数级增长。面对高维数据，常规的最小二乘方法不再适用，为了提高模型的可解释性和预测的准确度，变量选择变得很重要。如何高效地从众多的变量中筛选出对自变量有重要作用的若干个变量，是在对指纹图谱进行分析时亟需解决的问题。

另外，在现有的石斛检测标准中都是检测其中的多糖等大分子药效成分，但是，检测多糖等大分子成分需要的技术、仪器要求高，国内现有的仪器设备通常无法准确检测大分子成分，无法准确评价石斛的质量。

发明内容

本发明建立了鼓槌石斛化学小分子成分的相关特征指纹图谱，通过该图谱实现对鼓槌石斛药材相关化学小分子成分含量的关联性分析。采用化学小分子成分的相关特征指纹图谱获取反映药用鼓槌石斛相关化学小分子成分含量的信息。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：