[发明专利]一种仿生骨支架及其制备方法

权利要求书

1.一种仿生骨支架，其特征在于，它是由聚己内酯通过熔融法3D打印成不同结构的多孔支架，成骨细胞细胞外基质作为涂层粘附于支架纤维构成的，细胞外基质涂层由不同生理应变下周期压应力作用于成骨细胞，经脱细胞处理后得到；其特点聚己内酯支架提供符合松质骨结构特征和力学特征，细胞外基质涂层提供生物活性成分诱导成骨，力学刺激增强活性成分的质量和数量。

2.一种仿生骨支架的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)选择粘均分子量4.32-5万的聚己内酯为原料，熔融法3D打印制备骨支架，纤维直径为0.1mm-0.3mm；纤维间距为0.1mm-0.7mm；横纵经纬纤维垂直交错，层与层之间间距0.1mm-0.3mm 3D打印成50×50×3mm的正方体多孔支架，用模具剪裁成直径为6mm，厚度3mm圆柱形支架，消毒后备用。

(2)配制含体积浓度为10％FBS和体积浓度为1％双抗的α-MEM培养基，将成骨细胞系以12000/cm²适当密度接种于培养瓶中，在体积浓度5％CO₂，37℃细胞培养箱中进行培养；当细胞达到80％融合后，胰酶消化，以10⁴-10⁷/cm³密度接种于骨支架；4小时后加入培养基，细胞培养箱中进行培养。

(3)对成骨细胞-支架复合物施加表观应变为1000微应变-3000微应变的力学刺激，促使成骨细胞分泌各种活性物质，最终形成一定形貌和具有活性成分细胞外基质；以10毫摩尔/升NH₄OH结合反复冻融5次进行脱细胞处理，后用磷酸盐缓冲液反复漂洗；与聚己内酯纤维结合的细胞外基质用100单位/毫升DNase处理1小时后，磷酸盐缓冲液漂洗，冻干后4℃保存。