[发明专利]无血清细胞培养基及高效表达重组蛋白质的方法在审
申请号: | 201611137227.6 | 申请日: | 2016-12-09 |
公开(公告)号: | CN108220334A | 公开(公告)日: | 2018-06-29 |
发明(设计)人: | 郭亚军;寇庚;王延兵;张小萌;徐进;张存超 | 申请(专利权)人: | 上海迈泰君奥生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C07K19/00;C12N5/075 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 无血清细胞培养基 双功能融合蛋白 基础培养基 高效表达 培养基 无血清培养基 培养基组成 重组蛋白质 苯丙氨酸 甲硫氨酸 精氨酸 补充 鸟苷 腺苷 胸苷 修饰 | ||
1.一种新型CD47/PD-L1双功能融合蛋白的制备方法,包括以下步骤:a)一种新型抗CD47/PD-L1双功能融合蛋白:CD47结合部分具有SEQ ID NO: 2的氨基酸序列;PD-L1结合部分的轻链具有SEQ ID NO: 4的氨基酸序列,重链具有SEQ ID NO: 6的氨基酸序列;b)利用步骤a)所得核苷酸片断构建重组质粒,转染宿主细胞,筛选高表达克隆;c)使用改进的无血清细胞培养基大规模培养,获得抗CD47/PD-L1双功能融合蛋白,分离纯化;其特征在于,所述的改进的无血清细胞培养基由基础培养基和补充培养基组成,基础培养基中添加胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷和腺苷,补充培养基中添加精氨酸、苯丙氨酸及甲硫氨酸。
2.根据权利要求1所述的一种新型CD47/PD-L1双功能融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述使用无血清细胞培养基培养的温度为35℃~37℃。
3.根据权利要求2所述的一种新型CD47/PD-L1双功能融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述使用无血清细胞培养基培养的温度为36℃。
4.根据权利要求1所述的一种新型CD47/PD-L1双功能融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述使用无血清细胞培养基培养的pH值为6.5~7。
5.根据权利要求1所述的一种新型CD47/PD-L1双功能融合蛋白的制备方法,其特征在于,所述使用无血清细胞培养基培养的pH值为6.9。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海迈泰君奥生物技术有限公司,未经上海迈泰君奥生物技术有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201611137227.6/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。