[发明专利]一种非标记均相检测苯甲酸钠的比色法

说明书

一种非标记均相检测苯甲酸钠的比色法。本发明利用聚联乙炔囊泡受到外界扰动由蓝变红的光学特性，将联乙炔单体与苯甲酸半抗原——对氨基苯甲酸相连，制成囊泡探针，光聚合后囊泡显蓝色。该囊泡体系与苯甲酸抗体特异性结合，囊泡显红色，当检测体系中存在游离苯甲酸，囊泡探针由蓝变红的程度收到干扰，降低的程度与苯甲酸含量相关，由此建立了苯甲酸钠的快速检测体系。该法无需特殊仪器，定性测定时仅凭肉眼可视，定量测定时采用常规紫外分光光度计即可；操作简单，非均相测试，无需酶标记；方法灵敏，检测线性范围为0.01ng mL^‑1‑100ng mL^‑1，食品样品处理仅稀释即可，具有简单、经济、选择性好、灵敏度高等优点。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种非标记型均相比色检测苯甲酸钠的方法。

背景技术

苯甲酸(C₇H₆O₂)又称安息香酸，是苯环上的一个氢被羧基(-COOH)取代形成的化合物。在酸性条件下对真菌、细菌、霉菌的生长和繁殖有很强的抑制作用，故在食品中常作为防腐剂使用。苯甲酸分子态的抑菌活性较离子态高，故pH＜4时，抑菌活性高，抑菌的最适pH值为2.5～4.0，一般以低于pH值4.5～5.0为宜。由于苯甲酸对水的溶解度低，故实际多是加适量的碳酸钠或碳酸氢钠，用90℃以上热水溶解，使其转化成苯甲酸钠后才添加到食品中。但由于其对人体有一定毒性，特别是过量使用时会对人体造成危害，我国《食品安全国家标准-食品添加剂使用标准(GB-2760-2011)》限定了苯甲酸及其钠盐的使用范围和使用量。近年来，食品安全事件接连发生，食品安全问题引起了人们的高度关注。食品添加剂在食品中的残留检测有十分重要的意义。目前食品中苯甲酸钠的测定方法主要有气相色谱法/高效液相色谱法、薄层色谱法，这些方法测定准确度高，但操作相对复杂，需要专门高价仪器设备。因此，急需研究一种简便、经济、高灵敏和高选择性的苯甲酸检测方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种能快速检测苯甲酸钠的检测方法。聚联乙炔囊泡由于其特殊的光学性质受到广泛关注，由于自身是两亲分子，联乙炔会以囊泡的形式存在于溶液中，紫外光照射下联乙炔分子中两个相邻炔基通过1，4-加成反应生成聚联乙炔，可见光激发其分子骨架离域电子，使其产生π-π*跃迁，溶液显示为蓝色，紫外-可见光谱中最大吸收约为650nm。外界环境变化，如发生抗原-抗体反应等因素影响到囊泡骨架构象，离域电子运动状态也发生变动，紫外-可见光谱中最大吸收峰蓝移到540nm，囊泡体系转变为红色。