[发明专利]用于检测COX-1、COX-2和GPIIIa基因多态性的核酸、试剂盒及方法有效
申请号: | 201611107856.4 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN106834434B | 公开(公告)日: | 2020-04-07 |
发明(设计)人: | 李存耀;史学晖;段卫涛;赵平锋 | 申请(专利权)人: | 武汉海吉力生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 程殿军;张瑾 |
地址: | 430206 湖北省武汉市东湖技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 cox gpiiia 基因 多态性 核酸 试剂盒 方法 | ||
1.一组用于检测COX-1、COX-2和GPIIIa基因多态性的核酸,其特征在于,该核酸包括以下的引物对和检测探针:
COX-1基因A842G野生型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示;
COX-1基因A842G突变型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;
COX-1基因A842G检测探针:核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;
COX-2基因G-765C野生型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.7所示;
COX-2基因G-765C突变型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.7所示;
COX-2基因G-765C检测探针:核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;
GPIIIa基因T1565C野生型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示;
GPIIIa基因T1565C突变型引物对:核苷酸序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示;
GPIIIa基因T1565C检测探针:核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示;
2.如权利要求1所述的核酸,其特征在于,所述核酸还包括内部质控,所述内部质控包括质控引物对和质控探针,所述质控引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示,所述质控探针的核苷酸序列如SEQ ID No.15所示。
3.如权利要求1或2所述的核酸,其特征在于,所述核酸还包括如下阳性对照物:
COX-1基因A842G野生型阳性对照物:含有如SEQ ID No.16所示的核苷酸序列;
COX-1基因A842G突变型阳性对照物:含有如SEQ ID No.17所示的核苷酸序列;
COX-2基因G-765C野生型阳性对照物:含有如SEQ ID No.18所示的核苷酸序列;
COX-2基因G-765C突变型阳性对照物:含有如SEQ ID No.19所示的核苷酸序列;
GPIIIa基因T1565C野生型阳性对照物:含有如SEQ ID No.20所示的核苷酸序列;
GPIIIa基因T1565C突变型阳性对照物:含有如SEQ ID No.21所示的核苷酸序列;
和/或质控阳性对照物:含有如SEQ ID No.22所示的核苷酸序列。
4.一种用于检测COX-1、COX-2和GPIIIa基因多态性的试剂盒,其特征在于,该试剂盒用于实时荧光PCR检测COX-1基因A842G位点、COX-2基因G-765C位点和GPIIIa基因T1565C位点的野生型和突变型,所述试剂盒包括如权利要求1-3中任一所述的核酸,其中,各检测探针的5'端连接荧光基团,3'端连接淬灭基团,或/和质控探针的5'端连接有不同于所述检测探针的荧光基团,3'端连接有不同于所述检测探针的淬灭基团。
5.如权要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:PCR缓冲液、DNA聚合酶、dNTPs、矿物油、阴性对照物:水;所述荧光基团为FAM、JOE、CY3、HEX中任意一种,所述淬灭基团为MGB、BHQ1、TAMRA、BHQ2中任意一种。
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