[发明专利]一种五味子体细胞胚及其培养方法、培养基及应用

说明书

本发明公开了一种五味子体细胞胚及其培养方法、培养基及应用，属于五味子组织培养技术领域。本发明通过对体细胞胚诱导培养基的碳源、通气量和氮源的选择和控制，在培养的过程中，使体细胞胚生长以及木质素合成的达到最佳状态，培养得到的体细胞胚具有较高含量的木质素，本发明的五味子体细胞胚的培养方法以及由此方法得到的体细胞胚为五味子细胞培养生产次生代谢产物木质素的工厂化生产和产业化开发提供材料和依据。

技术领域

本发明涉及五味子组织培养技术领域，具体而言，涉及一种五味子体细胞胚及其培养方法、培养基及应用。

背景技术

五味子主产于吉林、辽宁、黑龙江、河北、山西、陕西、宁夏等北方各省的山区、半山区。五味子为常用中药之一，始载于《神农本草经》，列为上品。五味子的有效成分是木质素成分,已从五味子科植物中分离出23个联苯环辛二烯木质素类化合物,其中起主要作用的是五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、醋甲、醋乙、五味子酚，中医认为它具有收敛固涩、益气生津、被肾宁心的功能。近年医药学研究表明，五味子有抗疲劳、抗氧化、抗衰老、抗低温等作用，对治疗肝炎、急性肠道炎、神经衰弱、潜在克山病有一定疗效。五味子(Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.)的次生代谢产物木质素是工业生产中的主要原料之一，其具有广泛的应用价值。但现有的通过直接利用五味子果实直接提取木质素的技术容易受季节以及生长周期的限制，不利于木质素工业化生产，另外现有的通过组织培养方法培养得到的用作提取木质素原料的五味子愈伤组织中的木质素含量较低，不能起到促进利用五味子愈伤组织培养物为原料提取木质素的工业化生产规模的作用。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种五味子体细胞胚的培养方法，此培养方法采用组织培养技术对五味子外植体培养得到含有木质素的体细胞胚，并且通过该培养方法得到体细胞胚含有的木质素量较高。

本发明的第二目的在于提供一种用于培养五味子体细胞胚的培养基，该培养基能够诱导五味子胚性愈伤组织分化形成含有木质素的体细胞胚，且经该培养基培养得到体细胞胚中的木质素含量较高。

本发明的第三目的在于提供一种五味子体细胞胚，其由上述培养方法培养得到，其木质素含量较高，可用作提取木质素工业化生产中的原料。

本发明的第四目的在于提供五味子体细胞胚在制备木质素中的应用，以具有较高木质素含量的五味子体细胞胚用作提取木质素的原料，有利于实现木质素的大规模生产。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

一种五味子体细胞胚的培养方法，其包括：

取五味子外植体进行诱导培养，得到五味子胚性愈伤组织；

将所述五味子胚性愈伤组织接种至体细胞胚诱导培养基中，进行体细胞胚诱导培养，得到含木质素的体细胞胚；

其中，体细胞胚诱导培养基由每升1/2MS培养基中添加0.45-0.52mg BA、28-32g碳源以及0.4-0.6g氮源制成，体细胞胚诱导培养基pH为5.6-6.0，碳源是选自葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖以及山梨醇中的任意一种，氮源是选自椰汁、酵母提取物、水解酪蛋白以及水解乳蛋白中的任意一种。

一种用于培养五味子体细胞胚的培养基，其是由每升MS培养基中添加0.45-0.52mg BA、28-32g碳源以及0.4-0.6g氮源制成的体细胞胚诱导培养基，体细胞胚诱导培养基pH为5.6-6.0，碳源是选自葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖以及山梨醇中的任意一种，氮源是选自椰汁、酵母提取物、水解酪蛋白以及水解乳蛋白中的任意一种。

一种五味子体细胞胚，其上述五味子体细胞胚的培养方法培养所得到。

上述五味子体细胞胚在制备木质素中的应用。