[发明专利]一种基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法

权利要求书

1.一种基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法，其特征在于：使用可视化的用于细胞迁移和侵袭实验的微流控芯片，其中上层接种hepg2细胞，下层接种人诱导性多潜能干细胞，同时进行原位向心肌细胞的诱导分化；

所述微流控芯片的材料为可透光透气的聚二甲基硅氧烷聚合物，聚二甲基硅氧烷单体与引发剂比例为（15~5）:1，多孔滤膜材料为聚碳酸酯膜，聚碳酸酯膜的孔径为0.01μm-10μm；

所述微流控芯片的顶层芯片的下表面和多孔滤膜为不可逆封接，底层芯片的上表面和多孔滤膜为聚二甲基硅氧烷粘合;

微流控芯片的底层芯片内有成阵列排布的微柱，其中微柱的直径为200-800μm，微柱之间的距离为50-100μm，微柱的高度为200-900μm，且微柱的高度低于底层芯片细胞培养室的高度;

微流控芯片的顶层芯片设计有观察窗；

心肌细胞诱导分化的方法为：细胞接种24h形成拟胚体后，第一天加入12微摩尔的肝糖原合成激酶3β受体的选择性抑制剂作用24小时，第4天加入5微摩尔Porcn功能钝化剂IWP2作用2天，前6天加入1640/B27减低胰岛素培养基，第七天开始加入1640/B27培养基。

2.按照权利要求1所述基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法，其特征在于：所述基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法中所使用的微流控芯片中，顶层芯片的不可逆封接方法为：紫外活化1小时，硅烷化处理30分，氧等离子封接。

3.按照权利要求2所述基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法，其特征在于：所述基于微流控芯片的代谢依赖药物心肌毒性评价方法中所使用的微流控芯片中，底层芯片的聚二甲基硅氧烷粘合方法为：使用单体与引发剂比例为（15~25）:1的聚二甲基硅氧烷聚合物，在玻璃片上甩10μm-50μm厚的薄膜，底层芯片的上表面蘸取聚二甲基硅氧烷后，与已不可逆封接有上层芯片的多孔滤膜对齐封接。