[发明专利]一种比较断奶仔猪抗应激生理反应能力的标记引物和方法

说明书

本发明属于分子生物技术领域，提供一种比较断奶仔猪抗应激生理反应能力的标记引物和方法，该方法以与断奶仔猪肠道生长发育相关联的血清GA、Cor含量、仔猪小肠绒毛高度为对象，通过分析与血清GA、Cor含量呈正相关的候选基因GLS和EGFR的表达水平，与小肠绒毛高度呈正相关的候选基因IGF‑1、IGF‑R的表达水平，判断断奶仔猪抗应激生理反应能力。本发明根据候选基因表达情况可以快速获得断奶仔猪尤其是安徽地方品种安庆六白猪不同个体间的肠道发育以及对断奶抗应激生理反应能力的高低情况，减少选育过程中的复杂性，避免断奶仔猪因为受到刺激等因素导致生化指标急剧变化而与实际不符，保证了结果的准确性。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域，涉及一种断奶仔猪抗应激生理反应能力的标记引物和方法。

背景技术

仔猪早期断奶导致早期断奶综合症，采食量下降，体重减轻甚至停滞不长，免疫力下降，肠道结构和功能遭到破坏，容易发生腹泻和水肿，重度的会致死。早期断奶综合征导致的仔猪生长受阻，给养猪业带来巨大的经济损失。仔猪断奶相关研究一直是热点，Dunsford等(1989)研究发现，21日龄断奶仔猪在断奶后第3天肠绒毛高度显著下降，这种显著变化持续到断奶后第12天。顾宪红等(2001)研究结果表明断奶导致仔猪肠绒毛高度缩短，隐窝加深。断奶导致的仔猪肠道结构这种变化，造成肠道消化吸收面积减小，导致消化能力下降、养分吸收减少。因此，在断奶后具有更高的肠道发育状况的断奶仔猪生长状况会更加优良，也就是说具有更强的抗应激生理反应能力。通过在断奶仔猪日粮中添加仔猪所需的营养物质从而减轻断奶应激的相关研究已有很多。李垚等(2005)的研究表明，在21日龄断奶仔猪日粮中添加表皮生长因子可以提高促肾上腺皮质激素、皮质醇、胰岛素水平，促进肌肉蛋白质的合成与周转，增加蛋白质、脂肪、糖原的合成，刺激细胞的增殖与分化，有效地缓解断奶应激。杨彩梅等(2005)的研究表明，日粮中添加谷氨酰胺能促进断奶初期仔猪的采食和生长，能提高断奶仔猪小肠食糜中脂肪酶、淀粉酶和糜蛋白酶的活力。从现有研究中可以了解到，当断奶仔猪猪血清谷氨酰胺酶GA、皮质醇Cor含量越高、小肠绒毛高度约高对营养物质的吸收利用能力就越强，断奶仔猪的抗应激生理反应能力也就越强。GA是谷氨酰胺分解的关键酶和限速酶，仔猪断奶后，母源谷氨酰胺消失，小肠营养物质缺乏，体内谷氨酰胺水解代谢加强以缓断奶应激。仔猪断奶后血清Cor浓度会升高，促进仔猪体内合成代谢，使仔猪抗应激能力加强。Cor是介导动物体内应激反过程的一种重要中间介质，血清Cor浓度的高低能灵敏地反映机体遭受创伤程的强弱，因此可以把GA、Cor看作是判定动物遭受应激程度的一个敏感而有效指标。寻找到高血清GA、Cor含量和小肠绒毛高度的断奶仔猪，对提高断奶仔猪抗应激生理反应能力，减少断奶仔猪因断奶而引起的生长状况下降，提高效益减少养殖成本具有重要的意义。

已有研究表明不同猪种抗应激能力存在一定差异，且中国地方猪种抗应激能力普遍较外来猪种强。现有的研究表明，血清生化指标、肠黏膜形态是研究断奶仔猪断奶应激的重要指标，而现有的研究对地方猪种和外来猪种断奶应激差异性的报道较少。尤其是奶应激期，中外猪种仔猪的抗应激能力及其遗传机理相关研究目前未见报道。

发明内容

本发明的目的在于以安徽地方优良品种安庆六白猪和国外引进品种长白猪为研究对象，研究两个猪种在断奶应激期血清生化指标变化、肠黏膜形态变化。探讨品种间断奶应激期仔猪血清指标的差异、肠道结构发育和功能的差异、相关候选基因表达的差异以及基因表达与各抗应激生化指标的相关性，旨在找出安徽地方优良品种安庆六白猪候选基因与肠道发育的内在联系，筛选影响仔猪抗断奶应激能力及肠道发育的相关候选基因，为今后品种选育和新品系的建立提供参考。

1.本发明提供一种比较断奶仔猪血清GA、Cor含量以及小肠绒毛高度差异的标记引物，该引物对包括GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R；其中，

引物对GLS，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；