[发明专利]一种比较断奶仔猪抗应激生理反应能力的标记引物和方法有效
申请号: | 201611010663.7 | 申请日: | 2016-11-15 |
公开(公告)号: | CN106636356B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 丁月云;殷宗俊;张晓东;陈伟平;张威;黄龙;杨敏;胡洪;王源朗;朱树娇;张德磊;吴涛 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人: | 王菊珍 |
地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 比较 断奶 仔猪 应激 生理反应 能力 标记 引物 方法 | ||
1.一种比较断奶仔猪血清GA、Cor含量以及小肠绒毛高度差异的标记引物,其特征在于:该引物对包括GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R;其中,
引物对GLS,正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示;
引物对EGFR,正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示;
引物对IGF-1,正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示;
引物对IGF-1R,正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示。
2.一种比较断奶仔猪血清GA、Cor含量以及小肠绒毛高度差异的方法,其特征在于:该方法以与血清GA含量分别呈正相关的候选基因GLS和EGFR的表达水平比较不同断奶仔猪个体血清GA含量差异、与血清Cor含量分别呈正相关的候选基因GLS和EGFR的表达水平比较不同断奶仔猪个体血清Cor含量差异,与小肠绒毛高度分别呈正相关的候选基因IGF-1、IGF-R的表达水平比较不同断奶仔猪个体小肠绒毛高度差异。
3.一种比较断奶仔猪肠道发育状况的方法,其特征在于:该方法以与断奶仔猪肠道生长发育相关联的血清GA、Cor含量、仔猪小肠绒毛高度为对象,通过分析与血清GA含量呈正相关的候选基因GLS和EGFR的表达水平、与血清Cor含量呈正相关的候选基因GLS和EGFR的表达水平,与小肠绒毛高度分别呈正相关的候选基因IGF-1、IGF-R的表达水平,判定断奶仔猪肠道发育状况,标记基因表达水平高的断奶仔猪比标记基因表达水平低的断奶仔猪肠道发育更良好。
4.权利要求3所述的比较断奶仔猪肠道发育状况的方法,其特征在于:该方法具体包括如下步骤:(1)断奶仔猪小肠总RNA提取;(2)引物设计:分别设计候选基因GLS的反转录引物对GLS、候选基因EGFR的反转录引物对EGFR、候选基因IGF-1的反转录引物对IGF-1、候选基因IGF-1R的反转录引物对IGF-1R;(3)反转录合成cDNA:使用反转录试剂盒对步骤(1)得到的总RNA进行反转录合成cDNA;(4)采用步骤(2)的引物通过q-RT-PCR方法测定候选基因GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R在断奶仔猪个体小肠中的表达量;(5)根据各候选基因在不同断奶仔猪个体的表达量的差异确定不同断奶仔猪肠道发育状况;
其中,引物对GLS,正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示;
引物对EGFR,正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示;
引物对IGF-1,正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示;
引物对IGF-1R,正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示,反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示。
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