[发明专利]一种同时检测待测溶液中汞离子和铅离子的含量的方法

权利要求书

1.一种检测待测溶液中汞离子的含量的方法，包括步骤（a）、步骤（b）和步骤（c）：

所述步骤（a）包括如下步骤：

（a-1）杂交液和铅离子屏蔽剂混匀，孵育；

（a-2）完成步骤（a-1）后，加入待测溶液，孵育；

（a-3）完成步骤（a-2）后，采用Hg-Pb TD-PS探针检测荧光信号强度；

所述步骤（b）包括如下步骤：

（b-1）所述杂交液和汞离子标准溶液混匀，孵育；

（b-2）完成步骤（b-1）后，采用所述Hg-Pb TD-PS探针检测荧光信号强度；

所述步骤（c）：根据所述汞离子标准溶液中汞离子的浓度和相应荧光信号强度绘制标准曲线，将所述步骤（a-3）得到的荧光信号强度代入所述标准曲线，得到待测溶液中汞离子的含量；

所述杂交液含有酶链Hg-Pb TD-En和底物链Hg-Pb TD-Sub；

所述底物链Hg-Pb TD-Sub为单链核酸分子，自3’末端到5’末端依次包括如下元件：S1片段、S2片段和S3片段；所述S1片段由n1个T组成；所述S2片段的核苷酸序列为AAGGrA，rA代表腺嘌呤核糖核苷酸；所述S3片段由n2个T组成；所述底物链Hg-Pb TD-Sub的末端具有荧光猝灭基团；n1和n2均为大于等于12且小于等于18的自然数；n1>n2；

所述酶链Hg-Pb TD-En为单链核酸分子，自5’末端到3’末端依次包括如下元件：E1片段、E2片段和E3片段；所述E1片段由n3个A组成；所述E2片段的核苷酸序列为TGAAGTAGCGCCGCCGT；所述E3片段由n4个A组成；所述酶链Hg-Pb TD-En的末端具有荧光基团；n3和n4均为大于等于12且小于等于18的自然数；n3>n4；

所述Hg-Pb TD-PS探针为单链核酸分子，自5’末端到3’末端依次包括如下元件：P1片段和P2片段；所述P1片段由n5个脱氧核糖核苷酸组成，且不能与所述酶链Hg-Pb TD-En和所述底物链Hg-Pb TD-Sub进行杂交；所述P2片段由n6个T组成；n5和n6均为大于等于12且小于等于16的自然数。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述杂交液由所述酶链Hg-Pb TD-En和所述底物链Hg-Pb TD-Sub组成；

所述底物链Hg-Pb TD-Sub由所述S1片段、所述S2片段和所述S3片段组成；

所述酶链Hg-Pb TD-En由所述E1片段、所述E2片段和所述E3片段组成；

所述Hg-Pb TD-PS探针由所述P1片段和所述P2片段组成。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

所述底物链Hg-Pb TD-Sub的核苷酸序列如序列表中序列3所示；

所述酶链Hg-Pb TD-En的核苷酸序列如序列表中序列2所示；

所述Hg-Pb TD-PS探针的核苷酸序列如序列表中序列1所示。

4.一种检测待测溶液中铅离子的含量的方法，包括步骤（A）、步骤（B）和步骤（C）：

所述步骤（A）包括如下步骤：

（A-1）权利要求1至3中任一所述杂交液和汞离子屏蔽剂混匀，孵育；

（A-2）完成步骤（A-1）后，加入待测溶液，孵育；

（A-3）完成步骤（A -2）后，采用权利要求1至3中任一所述Hg-Pb TD-PS探针检测荧光信号强度；

所述步骤（B）包括如下步骤：

（B-1）权利要求1至3中任一所述杂交液和铅离子标准溶液混匀，孵育；

（B-2）完成步骤（B-1）后，采用权利要求1至3中任一所述Hg-Pb TD-PS探针检测荧光信号强度；

所述步骤（C）：根据所述铅离子标准溶液中铅离子的浓度和相应荧光信号强度绘制标准曲线，将所述步骤（A-3）得到的荧光信号强度代入所述标准曲线，得到待测溶液中铅离子的含量。

5.一种检测待测溶液中汞离子或铅离子含量的试剂盒，包括权利要求1至3中任一所述底物链Hg-Pb TD-Sub和酶链Hg-Pb TD-En；

所述试剂盒还包括权利要求1至3中任一所述Hg-Pb TD-PS探针。