[发明专利]一种黄管秦艽中龙胆苦苷的制备方法

说明书

本发明的目的在于提供一种黄管秦艽中龙胆苦苷的制备方法，以解决龙胆苦苷原料范围局限、工艺技术繁复、过程不易控制、成本较高的问题。制备方法步骤包括：提取、干燥、脱色和重结晶。本发明提供的龙胆苦苷的制备方法，利用黄管秦艽为原料，拓展了原料范围；对设备要求低；过程容易控制，工艺技术简化，生产成本低，得到龙胆苦苷达到90%以上，进一步用有机溶剂重结晶3‑5次可得到纯度98%以上的龙胆苦苷，高效液相色谱测定（HPLC外标法）纯度99%以上。

技术领域

本发明属于天然药物技术领域，具体涉及一种黄管秦艽中龙胆苦苷的制备方法。

背景技术

目前制备龙胆苦苷多采用溶剂提取和色谱分离相结合的方法，从原植物中提取龙胆苦苷粗提物，粗提物经硅胶柱色谱分离，氯仿、甲醇等一定体积比的混合溶剂洗脱，反复分离收集得龙胆苦苷。

另一方法是把原植物粉碎，加入一定量的水溶液加热提取2-3次，提取液通过大孔树脂吸附，洗脱液采用纳滤膜浓缩，浓缩液再经聚酰胺柱纯化，乙酸乙酯萃取浓缩结晶，重结晶，真空低温干燥得龙胆苦苷。

也有采用CO₂超临界萃取技术,甲醇作为夹带剂，提取龙胆苦苷的粗提物，再通过大孔吸附树脂吸附，一定浓度的乙醇洗脱，浓缩，有机溶剂结晶，制备龙胆苦苷。还有采用分析型高速逆流色谱仪的小量制备及半制备型高速逆流色谱仪，使用氯仿、甲醇、正丁醇、水等混合溶剂制备龙胆苦苷。

以上方法，需要使用设备要求较高的超临界萃取，高速逆流色谱仪和技术要求较高色谱分离，分离过程中应用氯仿、甲醇等有机溶剂，制得纯龙胆苦苷，这些方法原料成本高，使用有害溶剂，造成环境污染和生态的破坏，制备条件和工艺技术复杂，不易实现工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黄管秦艽中龙胆苦苷的制备方法，以解决龙胆苦苷原料范围局限、工艺技术繁复、过程不易控制、成本较高的问题。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种黄管秦艽中龙胆苦苷的制备方法，包括提取、干燥、脱色、重结晶四个步骤，具体步骤如下：

a.提取：取黄管秦艽粗粉，加入药材重量8-15倍量的亲水性有机溶剂，在30-60℃下提取3-5小时，过滤，滤液浓缩，回收有机溶剂，得到提取物；

b.干燥：将上述提取物在80-100℃下干燥至含水量不大于20%，得到干提取物；

c.脱色：将上述干提取物重量10-30倍量的亲水性有机溶剂加入干提取物中，再加入干提取物重量20-40%的活性炭，回流脱色后，过滤得到滤液，减压回收有机溶剂，析出晶体，冷藏放置3-5天，过滤得到龙胆苦苷粗晶体；

d.重结晶：将粗晶体加入亲水性有机溶剂制成热饱和，趁热抽滤，冷藏放置1-2天，滤过，重结晶3-5次，得龙胆苦苷结晶。通过3-5次重结晶过程纯化结晶，使龙胆苦苷结晶的纯度达到98%以上。

龙胆苦苷具有较强的亲水性，可溶于亲水性有机溶剂，根据药材重量加入溶剂，保证龙胆苦苷成分的溶出，防止由于溶液量不足造成过饱和使溶出不完全，30-60℃下提取可增加龙胆苦苷的溶出率，提取3-5小时保证龙胆苦苷的完全溶出，防止由于时间过短造成溶出不完全，通过过滤和浓缩，将龙胆苦苷与溶剂分离；由于龙胆苦苷在80-100℃时的热稳定性好，因此采用在常压条件下，用干热空气进行干燥，干燥温度低，干燥速度快，由于脱色步骤时还需要加入溶剂溶解，因此将干燥的终点为含水量不大于20%即可；龙胆苦苷干提取物含水量较粗粉低，因此加入10-30倍量的溶剂，保证龙胆苦苷干提取物的充分浸润，并且避免混合物中出现干粉、膏状等情况，造成活性炭无法对干燥物脱色，冷藏放置可以使溶液在静置状态下结晶，防止由于温度过高造成无法结晶或温度变化造成结晶解体，放置3-5天可以使结晶尽可能完全。

为了更好地实现本发明，具体步骤如下：