[发明专利]α淀粉酶变体及其应用有效
| 申请号: | 201610816934.1 | 申请日: | 2016-09-12 |
| 公开(公告)号: | CN107345223B | 公开(公告)日: | 2019-05-03 |
| 发明(设计)人: | 范岩;杜秀贞;郝名慧;卢嫣红;孙燕;徐红;李峰 | 申请(专利权)人: | 南京百斯杰生物工程有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/28 | 分类号: | C12N9/28;C12N15/57;C12N15/75;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/04;C12R1/125 |
| 代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;夏平 |
| 地址: | 211100 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淀粉酶 变体 及其 应用 | ||
1.一种α淀粉酶变体, 其特征在于所述的α淀粉酶变体通过在地衣芽胞杆菌(B.licheniformis)的α淀粉酶N端增加两个额外的氨基酸A和N,并且在C端增加五个额外的氨基酸KTTVS得到,同时仍然保持了亲代水解α-1,4糖苷键的能力;所述的α淀粉酶变体的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.4所示。
2.编码权利要求1所述的α淀粉酶变体的基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。
4.用于表达权利要求1所述的α淀粉酶变体的表达载体,其特征在于含有权利要求2或3所述的编码α淀粉酶变体的基因。
5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于所述的表达载体包括主要由一个天然或者合成的启动子序列,一个天然或合成的核糖体结合位点,一个天然或合成的终止子序列,以及权利要求3所述的编码α淀粉酶变体的基因序列一同组成了一个表达组件。
6.一种用于表达权利要求1所述的α淀粉酶变体的重组细胞,其特征在于包含权利要求2所述的编码α淀粉酶变体的基因。
7.根据权利要求6所述的重组细胞,其特征在于重组细胞的宿主细胞选自芽胞杆菌菌株。
8.根据权利要求7所述的重组细胞,其特征在于重组细胞的宿主细胞选自地衣芽胞杆菌(B. licheniformis)或经过基因工程改造失活了AprE和/或Blase的地衣芽胞杆菌。
9.一种权利要求1所述的α淀粉酶变体的生产方法,其特征在于包括在适宜α淀粉酶变体表达的条件下对含有编码α淀粉酶变体基因序列的重组细胞进行培养,并从重组细胞或者其培养上清液中获得α淀粉酶变体。
10.权利要求1所述的α淀粉酶变体在水解多糖的α-1,4糖苷键中的应用。
11.根据权利要求10所述的应用,其特征在于所述的α淀粉酶变体在高温和/或低pH条件下水解多糖的α-1,4糖苷键中的应用;所述的高温为80℃~110℃;所述的低pH为pH值为5.0~5.8。
12.根据权利要求11所述的应用,其特征在于所述的高温为100℃~110℃。
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