[发明专利]一种制备CAR‑T细胞的方法以及制得的CAR‑T细胞及其应用有效
| 申请号： | 201610744414.4 | 申请日： | 2016-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN106222201B | 公开（公告）日： | 2017-11-28 |
| 发明（设计）人： | 何霆;鲁薪安;尤亚南 | 申请（专利权）人： | 北京艺妙神州医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人： | 吴开磊 |
| 地址： | 100000 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 car 细胞 方法 以及 及其 应用 | ||
1.一种制备CAR-T细胞的方法，其特征在于，是将包含CAR的病毒感染CD3阳性T细胞得到所述CAR-T细胞；
所述CD3阳性T细胞采用以下方式制备：
从脐带血中制得脐带血单核细胞，然后从所述脐带血单核细胞中富集得到CD3阳性T细胞。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述从脐带血中制得脐带血单核细胞的步骤具体为：
所述脐带血按体积比1:0.8-1.2加入DPBS或者生理盐水，得到稀释的脐带血细胞；
所述稀释的脐带血细胞与淋巴细胞分离液混合，离心，吸取离心后的白膜层细胞；
得到的白膜层细胞与无血清细胞培养基混合后离心，沉淀即为所述脐带血单核细胞。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，从所述脐带血单核细胞中富集得到CD3阳性T细胞采用偶联CD3/CD28抗体的磁珠进行。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，制备得到的CD3阳性T细胞还包括进一步培养的步骤；
所述培养采用的培养基为Lonza x-vivo 15培养基。
5.权利要求1-4任一项所述的方法制备得到的CAR-T细胞。
6.含有权利要求5所述的CAR-T细胞的组合物。
7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含辅料。
8.根据权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述辅料为药用的稀释剂或赋形剂。
9.权利要求5所述的CAR-T细胞在制备治疗或预防癌症的药物中的应用。
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