[发明专利]一种纽莫康定B0的提取、纯化方法有效
申请号: | 201610740366.1 | 申请日: | 2016-08-27 |
公开(公告)号: | CN107778357B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 张贵民;王钦超 | 申请(专利权)人: | 鲁南制药集团股份有限公司 |
主分类号: | C07K7/56 | 分类号: | C07K7/56;C07K1/22 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276005 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 康定 b0 提取 纯化 方法 | ||
1.一种纽莫康定B0的提取、纯化方法,包括以下步骤:
1)将含有纽莫康定B0的发酵液在搅拌的状态下,调节pH值4.2-6,加入助滤剂,混匀,过滤,得到固体菌渣;
2)菌渣用高浓度的低分子醇-水溶液浸提,过滤,得浸提液;加纯水使浸提液中醇的浓度为20-30%(V/V);
3)用吸附树脂吸附浸提液后,依次用纯化水、30-50%(V/V)低分子醇—水溶液冲洗树脂,然后用低分子醇80-90%(V/V)—水溶液洗脱树脂,收集富含纽莫康定B0的洗脱液;
4)在洗脱液中加入洗脱液质量0.5-5%活性炭,在20-50℃条件下搅拌30-60分钟,过滤脱色;
5)纽莫康定B0脱色液经过超滤过滤后,加水稀释至醇的浓度20-30%(V/V),用吸附树脂吸附,先用30-50%(V/V)低分子醇—水溶液洗涤树脂,再用80-100%(V/V)低分子醇—水溶液洗脱,收集富含纽莫康定B0的洗脱液;
6)将收集到的纽莫康定B0洗脱液,在30-50℃条件下真空浓缩,得到类白色粗品;
所述的步骤1)中,调节pH值和加入助滤剂同时使用;
所述的步骤1)加入的助滤剂为硅藻土、珍珠岩、纤维素、氧化镁、石膏、酸性白土中的一种或几种;
所述的低分子醇为:甲醇、乙醇、丙醇中的一种;所述的高浓度为90-98%(V/V)的低分子醇—水溶液;
所述的步骤3)中,所用吸附树脂型号为skp-10-4300、D101、HPD300、HPD700、BS-5;
所述的步骤5)中,所用的吸附树脂型号为skp-40-4300、KB-SPE-HLB、Waters OasisHLB。
2.按照权利要求1所述的方法,其特征在于所述的步骤1)加入的助滤剂量为发酵液质量的0.5%-5%。
3.按照权利要求1所述的方法,其特征在于所述的步骤2)中,浸提液加入量为菌渣质量的2-5倍。
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