[发明专利]一种刺五加注射液的成分分析方法

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种刺五加注射液的成分分析方法。

背景技术

刺五加注射液为刺五加经提取加工而制成的灭菌水溶液，有平补肝肾，益精壮骨之功能，主治肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作，脑动脉硬化，脑血栓形成，脑栓塞等。刺五加的化学成分主要包括苯丙酸类、香豆素类、木脂素类、含氮碱基类、糖、氨基酸等。

由于刺五加注射液中成分种类较多，目前还没有一种检测分析方法能够较为全面的检测刺五加注射液中的多种成分，而市售刺五加注射液种类规格和生产厂家各不相同，缺乏统一全面的检测方法将使其质量控制面临严峻考验。另一方面，随着近年来刺五加注射液的广泛应用，其不良反应的报道也逐年增多，众所周知，中药注射液成分复杂，其中任何一种成分及其含量的变化均有可能成为致敏原因，因此对注射液成分及其含量的监测尤为重要。

由于刺五加注射液中成分种类较多，单一指纹图谱无法全面反映化合物的信息。目前建立起的刺五加注射液指纹图谱检测方法分辨率相对较弱，仅能识别15个左右的成分；谱图中各成分峰的区分度较差，相互之间存在明显干扰，直接影响检测分析结果的准确性；背景杂峰相对较多，对注射液中的活性成分峰存在影响，也会直接影响到检测分析结果的准确性；耗时相对较长，识别出15个左右的成分峰通常需要50分钟以上；流动相成分和浓度选择不合理，可能导致许多成分峰无法被识别到，进而无法监测注射液中的相应成分含量；并未对识别出的成分峰进行鉴定，因此无法得知识别出的所有成分峰对应的具体成分。

例如，中国专利申请200410044162公开了一种刺五加指纹图谱检测方法，采用0.1％的磷酸溶液作为A相，30％的乙腈70％水的水溶液作为B相进行梯度洗脱，采集70min之内数据。其附图公开的指纹图谱中，仅识别出14个成分峰，且除紫丁香苷外其他成分未知，背景杂峰相对较多，基线相对不平稳，区分度相对较小。

又例如，中国专利申请201210049755公开了一种刺五加组合物，含其制剂及其检测方法。其中还包括指纹图谱的检测方法，其特征在于，该指纹图谱的检测方法采用高效液相色谱法，应用Agilent的ZorboxEclipse XDB-C18色谱柱，柱温为20℃，流速为每分钟0.8ml，检测波长为270nm，理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于6000，且与其相邻的色谱峰的分离度应达到1.5以上，梯度洗脱程序如下：流动相A为0.5％的甲酸溶液，流动相B为乙腈和水，其体积比为30∶70，0分钟时为100％的流动相A；15分钟时为88％的流动相A和12％的流动相B；21分钟时为82％的流动相A和18％的流动相B；60分钟时为31％的流动相A和69％的流动相B；65分钟时为100％的流动相B；70-75分钟时为100％的流动相A。该方法仅能识别出14中成分峰，且基线相对不平稳，背景杂峰较多，严重影响对成分峰的判定。

中药注射液由于其成分相对较为复杂，因此质量控制的难度也相对较大，然而日渐增多的不良反应发生案例使得我们不得不面对如何提高其质量控制这一难题。就刺五加注射液而言，含有多种主要活性成分，除此之外还含有各种微量活性成分，无可避免的还含有一些杂质成分。如何一次就能将刺五加注射液中的各种成分尽可能多地识别出来，对其生产制造以及临床使用中的质量监控非常重要。

综上所述，提供一种刺五加注射液的成分分析方法，能够尽可能多的识别出其中的各种成分是其生产制造和临床应用中亟待解决的重要问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种刺五加注射液的成分分析方法。

所述的成分分析方法利用超高效液相色谱指纹图谱检测方法。

所述的指纹图谱检测方法包括以下步骤：

(1)、样品制备：精密量取待检测刺五加注射液1-5mL，加入与其等体积的稀释试剂，摇匀后，用0.22μm的微孔滤膜滤过，收集滤液，即为测试样品；