[发明专利]一种化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种新化合物及其制备方法和其应用。

背景技术

根据全国肿瘤登记中心发布的2012年数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。因此对于癌症病人来说及早检测出癌症，及时治疗至关重要。目前癌症诊疗的检测方法有影像学、细胞生物学、免疫学、基因、生化检测等方法。其中X射线、PET-CT、核磁共振成像、胃镜、结直肠镜、细胞活检等方法不但费用高，还可能对机体造成损伤。并且根据这些检测确认为癌症时，病人一般都处于癌症的中后期。利用癌症患者血清中特异物质含量升高，根据含量值高低辅助判定患者是否罹患癌症，可以实现癌症的早期检测。目前的癌症血清学检测有酶联免疫法，免疫比浊法，基因检测法、生化检测等。前几种方法检测步骤复杂，测定时间长，需要掌握技术的特定人员操作。酶联免疫检测类容易受到血浆、血清蛋白以及其他抗体和代谢物的干扰。基因诊断类试剂盒检测费用高，对操作的技术要求比较高。

唾液酸(SA)是细胞表面糖蛋白和糖脂的重要成份，它与细胞间的粘着、接触抑制，细胞的癌变及肿瘤转移、扩散有密切的关系。当细胞癌变时，肿瘤细胞表面唾液酸密度增加，很多糖蛋白唾液酸化，大量SA脱落进入血液循环，故癌症病人血清SA含量明显升高。

羟脯氨酸作为胶原蛋白中的特异性氨基酸，可以反映机体中胶原蛋白含量的变化，在肿瘤疾病进展过程中会破坏基底膜，基底膜中胶原释放入血，使血清中羟脯氨酸含量升高，骨肿瘤也会破坏大量胶原，使羟脯氨酸含量升高；除此之外，多数晚期肿瘤病人由于转移等会大量破坏组织胶原，也会使血清中羟脯氨酸的含量急剧升高，故测定血液中游离羟脯氨酸含量对肿瘤的诊断有重要临床意义。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种新型的化合物，可以简单、方便地用于癌症的早期检测，且不会对人体造成损伤。

本发明的化合物，结构式如式(I)所示：

该化合物分子式为C₁₇H₁₃NO₅，其分子量为311.0794，外观为黄色，在450nm处有最大吸收峰。

本发明还提供式(I)化合物的制备方法，步骤如下：

(1)将0.1mL 5mg/mL的唾液酸和2mL显色剂充分混匀后置沸水浴(持续沸腾)中反应15min，迅速取出置于室温水(<25℃)中冷却3-8min，所述显色剂组份为：茚三酮0.005-4％，对二甲氨基苯甲醛0.005-3％，HCl 2-20％，余量为纯化水，其中的百分比均为质量分数；

(2)将上述制备得到的液体过0.22μm微孔滤膜；

(3)将上述过滤后的液体，进高效液相色谱仪，采用Kromasil C18色谱柱，以40％乙腈/水为流动相进行高效液相色谱纯化分离，按式(I)化合物色谱峰出峰时间9.49min收集馏分，合并收集液后40-50℃旋转蒸发浓缩以去掉溶剂，获得纯化后的式(I)化合物。

所述40％乙腈/水为乙腈：水的体积比40％：60％的溶液。

本发明还提供了式(I)化合物在癌症检测中作为显色指示剂的应用。

进一步地，式(I)化合物作为显色指示剂应用时，用纯化水配制成显色指示剂标准溶液，其中：式(I)化合物0.01％-3％、HCl 0.1-20％、苯甲酸0.05-5％、余量为水，均为质量分数。

本发明还提供了式(I)化合物在癌症检测制品中的应用。

本发明还提供了一种癌症检测制品，包括显色剂和校准品，所述显色剂包括以下组份：茚三酮0.005-4％，对二甲氨基苯甲醛0.005-3％，HCl 2-20％，余量为纯化水，均为质量分数；所述校准品为式(I)化合物制成的显色指示剂标准溶液。

本发明还提供了上述癌症检测制品的检测方法，步骤如下：

(1)取待测血清0.1mL加到含2.0mL显色剂的离心管中，充分混匀，将离心管置沸水浴(能够保持持续沸腾)中反应15分钟；

(2)迅速取出离心管置于室温水(<25℃)中冷却3-8分钟，终止反应；

(3)离心管以2500-3500转/分离心5-15分钟，去沉淀，取上清液；

(4)分别测定血清上清液及校准品在450nm处的吸光光度值，得到BXTM值＝(血清的吸光光度值/校准品的吸光光度值)×100U/mL；或者直接用半自动生化分析仪测定校准品和血清上清液的BXTM值；