[发明专利]一种杏鲍菇菌种鉴别的方法及专用DNA条形码片段

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种杏鲍菇菌种鉴别的方法及专用DNA条形码片段。

背景技术

改革开放以来，我国食用菌产业迅速发展，已成为世界上最大的食用菌生产大国。杏鲍菇是近年来栽培成功的集食用、药用、食疗于一体的珍稀食用菌新品种。杏鲍菇营养丰富，富含蛋白质、碳水化合物、维生素及钙、镁、铜、锌等矿物质，可以提高人体免疫功能，对人体具有抗肿瘤、降血脂、润肠胃以及美容等作用。菌种在杏鲍菇产业的发展中起着重要的、不可替代的作用。近年来菌种事故多数是菌种错误造成的，不法从业者利用假冒伪劣菌种扰乱市场，谋取不当利益。因此，杏鲍菇菌种的真实性检测显得至关重要。常规检测手段主要有：肉眼感官观察、菌丝生长速度、农艺性状和商品性状检验、同工酶电泳法、ISSR法等。这些方法耗时多，具有一定的组织与发育阶段的特异性，结果不可靠。

DNA条形码技术利用一段通用的DNA序列，对物种进行快速准确鉴定。该技术鉴定样品不受其生长发育阶段影响、所需材料少，简单便捷，所需时间短，结果可靠，可以实现对杏鲍菇菌种快速准确的物种鉴定。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种DNA片段。

本发明提供的DNA片段，为如下1)或2)或3)：

1)、序列3所示的DNA片段；

2)、序列3第21-374位核苷酸所示的DNA片段；

3)、为与1)或2)所示片段的核苷酸序列同源性大于99％的片段。

本发明的另一个目的是提供所述DNA片段的新用途。

本发明提供了所述DNA片段在鉴别或辅助鉴别杏鲍菇菌种中的应用。

本发明第3个目的是提供检测杏鲍菇菌种基因组中是否含有所述DNA片段的物质的新用途。

本发明提供了检测杏鲍菇菌种基因组中是否含有所述DNA片段的物质在鉴别杏鲍菇菌种中的应用。

上述应用中，所述检测杏鲍菇菌种基因组中是否含有所述DNA片段的物质为如下1)或2)：

1)用于扩增所述DNA条形码片段的引物对；

2)含有所述引物对的PCR试剂或试剂盒。

上述应用中，所述引物对由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链DNA分子组成。

或所述PCR试剂中，所述引物1和所述引物2的摩尔比为1:1。

或所述PCR试剂中，所述引物1和所述引物2的浓度均为10μmol/L。

本发明第4个目的是提供一种鉴别或辅助鉴别杏鲍菇菌种的方法。

本发明提供的方法，包括如下步骤：检测待测样品中是否含有所述DNA片段；如果含有，则待测样品为或候选为杏鲍菇菌种；如果不含有，则待测样品不为或候选不为杏鲍菇菌种。

上述方法中，

所述检测待测样品中是否含有所述DNA片段的方法包括如下步骤：

1)用序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链DNA分子组成的引物对对待测样品进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；

2)测序所述PCR扩增产物，将所述PCR扩增产物的序列与所述DNA片段进行比对，若同源性大于99％，则待测样品中含有所述DNA片段，若同源性小于等于99％，则待测样品中不含有所述DNA片段。

上述方法中，

所述PCR扩增的模板为待测样品的基因组DNA。

本发明第5个目的是提供检测杏鲍菇菌种基因组中是否含有所述DNA片段的物质。

本发明提供的检测杏鲍菇菌种基因组中是否含有所述DNA片段的物质，其为如下1)或2)：

1)用于扩增所述DNA条形码片段的引物对；

2)含有所述引物对的PCR试剂或试剂盒。

上述物质中，所述引物对由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链DNA分子组成。

或所述PCR试剂中，所述引物1和所述引物2的摩尔比为1:1。

或所述PCR试剂中，所述引物1和所述引物2的浓度均为10μmol/L。