[发明专利]前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒

权利要求书

1.一种前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，其包括针对检测目标基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统；所述目标基因包括有前列腺癌特异性基因、上皮细胞标志基因、和间质细胞标志基因，所述前列腺癌特异性基因选自PSA、PSMA、PSAP、NKX3.1、P501S中至少两种；所述上皮细胞标志基因选自EPCAM、CDH1、CK8、CK18中的至少两种；所述间质细胞标志基因选自SURVIVIN、VIMENTIN、AKT2、TWIST1中至少两种；所述信号放大系统包括有末端修饰有荧光基团的扩增探针，或包括有扩增探针和末端修饰有荧光基团的标记探针，不同种类目标基因的荧光基团互不相同；其中，

所述捕获探针用于连接目标基因mRNA与扩增探针，每条捕获探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：可与待检测的目标基因mRNA结合的特异性序列P1、间隔臂序列、P2序列，所述P2序列为不存在发夹结构、探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配，与P1、P4和目标基因mRNA之间均不存在特异性结合的序列，针对同一类别目标基因的捕获探针的P2序列相同；

每条扩增探针从5’端到3’端的碱基组成依次为：能与相应捕获探针的P2序列互补配对的P3序列、间隔臂序列、P4序列；所述P4序列为不存在发夹结构、探针内部和探针间不形成二聚体、不存在错配、与P1、P2、P3和总mRNA之间均不存在特异性结合的序列；

每条标记探针具有与相应扩增探针P4序列互补配对的P5序列。

2.根据权利要求1所述的前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，所述目标基因还包括排除基因，所述排除基因选自CK7、CK20、CD45中至少两种。

3.根据权利要求1或2所述的前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，所述前列腺癌特异性基因的捕获探针中：针对PSA基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.10中的2条或2条以上，针对PSMA基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.11～SEQ ID NO.20中的2条或2条以上，针对PSAP基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.21～SEQ ID NO.30中的2条或2条以上，针对NKX3.1基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.31～SEQ ID NO.40中的2条或2条以上，针对P501S基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.41～SEQ ID NO.50中的2条或2条以上。

4.根据权利要求1或3所述的前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，针对前列腺癌特异性基因的捕获探针的特异性序列P2为SEQ ID NO.161；所述前列腺癌特异性基因的扩增探针中，P3序列为SEQ ID NO.165，P4序列为SEQ ID NO.169。

5.根据权利要求1所述的前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，所述上皮细胞标志基因的捕获探针中：针对EPCAM基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.51～SEQ ID NO.60中的2条或2条以上，针对CDH1基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.61～SEQ ID NO.70中的2条或2条以上，针对CK8基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.71～SEQ ID NO.80中的2条或2条以上，针对CK18基因的特异性序列P1选自SEQ ID NO.81～SEQ ID NO.90中的2条或2条以上。

6.根据权利要求1或5所述的前列腺癌组织溯源CTC分型鉴定试剂盒，其特征在于，针对上皮细胞标志基因的捕获探针的特异性序列P2为SEQ ID NO.162；所述上皮细胞标志基因的扩增探针中，P3序列为SEQ ID NO.166，P4序列为SEQ ID NO.170。