[发明专利]一种从小叶莲中提取分离半日花烷型二萜类化合物的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种从小叶莲中提取分离半日花烷型二萜类化合物的方法及其应用。

背景技术

恶性肿瘤已经成为当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。具有疗程长、难治愈的特点。在世界卫生组织第18届国际抗癌症联盟大会上的一项研究报告表明，未来20年内新增患病人数将由目前的每年1000万增加到1500万，因癌症而死亡的人数也将由每年600万增至1000万。全球癌症状况将日益严重，在我国恶性肿瘤死亡率位居全部疾病死亡率之首。目前临床上广泛使用的合成的抗肿瘤药物普遍存在着毒副作用如脱发、贫血和胃肠不适等现象。因此加强抗肿瘤药物的研究，延长患者的生存期，改善患者的生活质量是药学工作者的当务之急。中草药在抗肿瘤方面的应用历史悠久，从中草药中寻找高效低毒的抗肿瘤活性物质，研制选择性强、毒副作用低的新型抗肿瘤药物是药学科研工作者迫切解决的首要问题。

小叶莲是小檗科桃儿七属植物鬼臼Sinopodophyllum emodi(Wall.)Ying.的干燥成熟果实。鬼臼是一种具有悠久历史的药用植物，古代《神农本草经》中就有记载：杀大毒，疗咳嗽喉疾，风邪烦感，失魄妄见。不入汤。以后的历代本草亦多有记载，主要用于活血散结、祛风除湿、虫蛇咬伤、跌打、心胃痛、风寒咳嗽、月经不调、铁棒锤中毒、风湿筋骨痛及气管炎等症。鬼臼分布比较广泛，我国主要分布在四川、青海、西藏、甘肃、陕西。小叶莲作为传统藏药始载于《月王药诊》，具有悠久的药用历史。化学成分研究表明主要含有木脂素和黄酮类化合物，而半日花烷型二萜类化合物首次在该属植物中被发现。本发明所涉及的从小叶莲中制备半日花烷型二萜类化合物及其抗肝癌和乳腺癌活性，迄今为止未见有专利或文献报道。

由于生物合成的复杂性，天然产物的结构也复杂多样。以常规的色谱学方法为主的分离纯化手段往往很难将结构非常相似的天然产物分离开来，而天然产物中混有痕量的高活性的杂质会导致生物活性的错误结论。据相关报道，天然产物熊果酸具有120种生物活性，有些生物活性在不同的文献中是完全相反的，如抗菌活性，细胞毒活性。出现这样结论的原因是，测试活性所用的熊果酸样品不是单一的熊果酸化学实体，与其共存的杂质严重影响了活性结果。因此建立完善的天然产物纯度评价方法是其准确的生物活性评价的必要条件。同时高纯度的天然产物也是相关药材质量评价所必须的。因此天然产物的纯度评价是非常重要的。

半日花烷型二萜是以十氢萘环合而成的母核为基本骨架的二萜。具有抗炎、抗癌、保肝利胆、降血糖、抗生育等作用。此类化合物的纯度可以通过薄层色谱和高效液相色谱法测定，这两种纯度鉴定方法不仅需要相应的对照品、操作方法复杂耗时长，而且由于天然产物特别是半日花烷型二萜类化合物的结构多样性和复杂性，容易产生误差。定量核磁共振氢谱法，由于其操作快速简便、样品消耗量少、同时给出定性的结构信息和定量分析结果，特别是定量核磁共振氢谱法不依赖于被测物的高纯度标准品，因此定量分析的成本大大降低。利用定量核磁共振氢谱法进行半日花烷型二萜类化合物的纯度测定是一项非常重要的研究工作。但至今尚未见到采用定量核磁共振氢谱法测定具有7(8)双键的半日花烷型二萜类化合物的纯度的公开报道。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种从小叶莲中提取半日花烷型二萜类化合物的方法及其应用，可有效解决从小叶莲中提取分离(制备)半日花烷型二萜类化合物及纯度测定和制备抗乳腺癌、肝癌药物中的应用问题。

本发明解决的技术方案是，所述的从小叶莲中提取半日花烷型二萜类化合物为labda-7,13-diene-3,15-diol(I)和14,15-dinor-3β-hydroxy-7-labden-13-one(II)，分子结构式分别为：