[发明专利]一种胶束电动毛细管电泳法测定γ‑氨基丁酸含量的方法

权利要求书

1.一种胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，包括有如下步骤：

(1)石英毛细管柱的选择及预处理：

(2)电泳分析条件：

(3)绘制γ-氨基丁酸标准曲线：以γ-氨基丁酸标准样品的浓度和峰面积为坐标绘制γ-氨基丁酸标准曲线；

(4)样品衍生：

(5)γ-氨基丁酸的定量分析，其特征在于：所述步骤(2)中的电泳分析条件中：缓冲液pH＝8.0～10、60～80mmol/L硼砂-40～60mmol/L十二烷基硫酸钠-20～30mmol/Lβ-环糊精-质量浓度为1％～5％的异丙醇的混合物，缓冲液预冲洗10min，进样方式为0.3～0.6psi压力进样，进样时间4～7s，正向电压为10～25kv，毛细管柱温20～30℃，检测波长为214nm。

2.根据权利要求1所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于所述步骤(1)中石英毛细管柱的选择及预处理：选用未涂层的50cm×75μm石英毛细管柱；所述石英毛细管柱先依次用甲醇冲洗10min，蒸馏水冲洗5min，1mol/LNaOH溶液冲洗30min，蒸馏水冲洗5min，最后再用运行缓冲液冲洗10-15min；每次进样前，用蒸馏水及运行缓冲液先后冲洗2min；运行缓冲液及样品溶液均用0.22μm微孔针头过滤器过滤；所述运行缓冲液为：pH＝9.5、40mmol/L硼砂-50mmol/L十二烷基硫酸钠-30mmol/Lβ-环糊精-体积浓度为3％的异丙醇的混合物。

3.根据权利要求1所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于所述步骤(2)中缓冲液为60mmol/L硼砂-60mmol/L十二烷基硫酸钠-20mmol/Lβ-环糊精-质量浓度为3％的异丙醇的混合物。

4.根据权利要求1所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于步骤(4)中样品衍生的衍生剂为20mmol/L芴甲氧羰酰氯，衍生方法为取待处理样品1ml加入等量的衍生剂，混匀，2min后加入1ml正戊烷，混匀静置，分层后取下清。

5.根据权利要求1所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于步骤(5)中γ-氨基丁酸的定量分析为：取待处理样品，经过步骤(4)的衍化处理后，按照步骤(2)进样，获γ-氨基丁酸吸收峰面积，便可根据步骤(3)的标准曲线得到γ-氨基丁酸对应的质量浓度，便可对样品中的γ-氨基丁酸定量。

6.根据权利要求1所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于所述步骤(3)中所述γ-氨基丁酸标准曲线是以γ-氨基丁酸标准样品的浓度和峰面积为坐标绘制γ-氨基丁酸标准曲线，为y＝0.000252x。

7.根据权利要求4所述的胶束电动毛细管电泳法测定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征在于所述步骤(4)中衍生剂的配制方法为：准确称取芴甲氧羰酰氯0.5174g，以乙腈为溶剂，定容至100ml。