[发明专利]产环糊精葡萄糖苷转移酶的基因工程菌及其应用

权利要求书

1.一种产环糊精葡萄糖苷转移酶的基因工程菌，其特征在于，该基因工程菌是将环糊 精葡萄糖苷转移酶基因通过载体导入到宿主细胞中得到的，其可将产生的环糊精葡萄糖苷 转移酶留在细胞内；其中所述的载体为质粒载体pET28a。

2.权利要求1所述的产环糊精葡萄糖苷转移酶的基因工程菌，其特征在于，所述宿主细 胞中导入有含分子伴侣Dnak-DnaJ-GrpE-GroES-GroEL的质粒pGKJE8。

3.权利要求2所述的基因工程菌的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将质粒pGKJE8转入感受态宿主细胞中，挑选出转化菌株，制成感受态细胞；

2）将环糊精葡萄糖苷转移酶基因导入到质粒载体pET28a中，构建得到pET28a-cgt表达 质粒，然后转入感受态细胞中，通过选择培养基挑选得到基因工程菌。

4.权利要求1或2所述的基因工程菌在产环糊精葡萄糖苷转移酶中的应用。

5.权利要求1或2所述的基因工程菌在产2-O-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸中的应用。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：

1）将基因工程菌接种至种子培养基，进行种子培养；

2）将步骤1）培养好的种子培养液接种至发酵培养基中,30℃培养2-8h，加IPTG，继续 培养至24h，停止发酵，离心，弃上清，用磷酸缓冲液重悬，超声，获得环糊精葡萄糖苷转移酶 粗酶液。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤2）中加入的IPTG浓度为0.01mM- 0.4mM。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤2）中所述发酵培养基中碳源浓度为5- 30g/L。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤2）中所述发酵培养基中碳源为麦芽 糖。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，步骤2）中所述发酵培养基中碳源浓度为 15g/L。