[发明专利]化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及化合物及其制备方法和应用，具体地，提供了一种2‑羟基‑5硝基苯甲醛衍生物，其为式(Ⅰ)所示化合物，其中，R¹为H或甲基；R²为H、C_1‑6烷基或C_6‑10芳基；R³为H、C_1‑6烷基或C_6‑10芳基。在多肽制备过程中，利用该化合物能够打破肽链氨基酸残基之间的相互作用，进而能够抑制多肽链的二级结构的形成，打破羰基与氨基之间的氢键相互作用，减少了多肽合成过程中聚集现象的发生，使得难溶性多肽片段的合成、分离纯化和表征过程与常规水溶性多肽类似，从而可以高效制备困难序列多肽。

技术领域

本发明属于多肽/蛋白合成技术领域，具体地，涉及化合物及其制备方法及利用其制备疏水性膜蛋白/困难序列多肽的方法。

背景技术

膜蛋白基因组包含了所有哺乳动物基因组的20％～30％，在信号传导、物质运输以及生物催化方面具有极其重要的作用，大多数膜蛋白都成为现代制药公司研究药物的重要靶点，在已知药物中约有50％的药物作用靶标是膜蛋白。因此，膜蛋白结构和功能的研究将为药物的合理设计带来广阔的前景。但是，目前对这些数量庞大的重要膜蛋白的结构-功能的认识匮乏。这是由于膜蛋白自身的疏水性，很难得到足够量的且纯度较高的膜蛋白用于晶体和核磁进行结构分析。通过生物重组表达的方法，常常会存在效率差、细胞毒性大等问题，且无法得到精确修饰的蛋白序列。

另一方面，蛋白化学合成技术为获得膜蛋白样品提供了新的途径。蛋白化学合成技术能实现蛋白的原子尺度的精度的精确调控，得到含D-氨基酸、主链骨架的“氧酯”修饰、同位素标记、荧光标记、糖基化翻译后修饰等的功能特异性的膜蛋白。例如，诺贝尔奖获得者MacKinnon和同事通过化学合成得到一个带修饰的钾离子通道KcsA^D-Ala77，该修饰将77位甘氨酸替换为D-型丙氨酸。使用这种人工设计合成的膜蛋白工具，获得了钾离子通道的选择性的机理。这显示出化学合成膜蛋白的应用前景巨大。

但是，当前使用化学合成手段得到的膜蛋白例子极少，膜蛋白样品制备是蛋白化学合成领域的重大挑战之一。这是因为膜蛋白跨膜肽片段的强疏水性特征以及肽片段形成的α-螺旋等二级结构之间的分子间相互作用导致沉聚，导致膜肽片段溶解度极差，造成膜蛋白跨膜肽片段分离纯化和膜蛋白肽片段连接困难，所以很难得到足够量的且纯度较高的困难序列多肽和膜蛋白用于结构、功能以及药物的研究。