[发明专利]用于节肢动物生物多样性高通量测序的复合标签及其应用在审

专利信息
申请号: 201610079412.8 申请日: 2016-02-04
公开(公告)号: CN105624302A 公开(公告)日: 2016-06-01
发明(设计)人: 王雪芹;高其康;王光华;祝增荣;程家安 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 胡红娟
地址: 310027 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 用于 节肢动物 生物多样性 通量 复合 标签 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种用于节肢动物生物多样性高通量测序的复合标签,其特征在于,其碱基序列如以下序列编号NO.1~NO.48所示:

2.一种利用权利要求1所述复合标签进行超高通量基因测序的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)提取每一个样本的总DNA;所述样本为含有节肢动物的环境样本;

(2)对每一个样本,从权利要求1中所示48对且未被选择过的序列中选择任意一对序列作为引物,对对应样本的总DNA进行扩增;对对应样本的总DNA进行扩增的PCR扩增体系为:

1μL样本总DNA,25μL2×Buffer,10μL dNTP,1μL KOD FX酶,浓度为10μM上下游引物各5μL,补水至50μL;

(3)对每一个样本的扩增产物进行电泳检测,对扩增产物进行纯化回收;

(4)对每个样本纯化回收后的产物进行精确定量;

(5)将所有样本等量混合后建立一个测序文库;

(6)对所建测序文库进行高通量测序。

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