[发明专利]一种猪MITF基因突变的检测方法有效
| 申请号： | 201610079293.6 | 申请日： | 2016-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN107034268B | 公开（公告）日： | 2020-08-21 |
| 发明（设计）人： | 王红梅;周琪;赵建国;孟安明;曹春伟;海棠;祁蒙 | 申请（专利权）人： | 中国科学院动物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 李渤;郭广迅 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 mitf 基因突变 检测 方法 | ||
1.一种猪MITF基因突变的检测方法，其特征在于，所述方法包括：
1)通过PCR扩增猪MITF基因的外显子；所述猪为具有全身白化和听力缺失的表型的广西巴马小型猪；
2)判断猪MITF基因的第8号外显子上是否存在C.740TC的单核苷酸碱基突变；
其中，所述单核苷酸碱基突变为核酸序列GGGAACCATTTTAAAAGCCTCC的第12位的TC突变；
其中，步骤2)是通过选自DNA直接测序、杂交测序、酶切测序、DNA芯片技术、变性高效液相色谱中的一种或多种方法实现的；
所述检测方法不用于疾病的诊断和治疗目的。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述PCR的引物包含序列为SEQ IDNO:15的正义引物和序列为SEQ ID NO:16的反义引物。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述PCR的反应条件为：
反应条件：
95℃预变性3分钟，94℃变性30秒，59℃退火30秒，72℃延伸1分钟，30个循环后72℃再延伸5min。
4.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，步骤1)所述PCR的引物包括:
序列为SEQ ID NO:1的正义引物和序列为SEQ ID NO:2的反义引物；
序列为SEQ ID NO:3的正义引物和序列为SEQ ID NO:4的反义引物；
序列为SEQ ID NO:5的正义引物和序列为SEQ ID NO:6的反义引物；
序列为SEQ ID NO:7的正义引物和序列为SEQ ID NO:8的反义引物；
序列为SEQ ID NO:9的正义引物和序列为SEQ ID NO:10的反义引物；
序列为SEQ ID NO:11的正义引物和序列为SEQ ID NO:12的反义引物；
序列为SEQ ID NO:13的正义引物和序列为SEQ ID NO:14的反义引物；
序列为SEQ ID NO:17的正义引物和序列为SEQ ID NO:18的反义引物；
序列为SEQ ID NO:19的正义引物和序列为SEQ ID NO:20的反义引物；
序列为SEQ ID NO:21的正义引物和序列为SEQ ID NO:22的反义引物。
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